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蜕皮甾酮对口腔扁平苔藓上皮细胞TLRs/NF-κB信号通路的调节作用
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作者 曾旖 杨军 +1 位作者 范舒 张从纪 《海南医学院学报》 CAS 2014年第2期145-148,153共5页
目的:研究Toll样受体/核转录因子-kB (TLRs/NF-kB)信号通路在口腔扁平苔藓(oral lichen plus,OLP)病理过程中的作用,探讨说皮甾_ (ecdysterone, EDS)在OLP治疗中的作用效应。方法: (1)脂多糖(LPS)刺激人口腔黏膜角质形成... 目的:研究Toll样受体/核转录因子-kB (TLRs/NF-kB)信号通路在口腔扁平苔藓(oral lichen plus,OLP)病理过程中的作用,探讨说皮甾_ (ecdysterone, EDS)在OLP治疗中的作用效应。方法: (1)脂多糖(LPS)刺激人口腔黏膜角质形成细胞(HOK)建立体外OLP炎症模型,采用Real time RT- PCR检测NF-/κB p65,TLR4和肿瘤坏死因子-a(TNF-a)mRNA在该模型中的表达情况;(2)EDS干预 HOK细胞后,RT-PCR检测NF-K;Bp65、TLR4和TNF?amRNA的表达情况。结果:体外OLP炎症模 型中NF-κB p65、TLR4和TNF-amRNA表达量上调,且呈LPS浓度及作用时间依赖性,LPS浓度为 10吨/mL,作用6 h时表达量最高。EDS能够下调NF-κB p65、TLR4和TNF-amRNA的表达,EDS 最佳作用浓度是100 pg/mUPCO.Ol)。结论:EDS对OLP的抗炎及免疫调节作用与TLRs/NF-κB 信号通路密切相关,EDS可能通过抑制TLRs的激活,调控NF-/κB的表达,最终抑制OLP炎症介质活 化与黏膜损伤。 展开更多
关键词 口腔扁平苔藓(OLP) Toll样受体 核转录因子-kB(TLRs NF- cB) 蜕皮甾酮(EDS)
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NGAL测定在急性肾损伤诊断中应用的研究进展 预览 被引量:5
2
作者 何莹 陈安 胡川闽 《医学综述》 2014年第22期4044-4046,共3页
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)存在于中性粒细胞的过氧化物酶阴性颗粒中,并在人体组织细胞中广泛分布。近年研究发现,NGAL与肾脏关系十分密切,可能参与启动肾脏发育并发挥保护肾脏的作用。众多实验室和临床研究表明,急性肾... 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)存在于中性粒细胞的过氧化物酶阴性颗粒中,并在人体组织细胞中广泛分布。近年研究发现,NGAL与肾脏关系十分密切,可能参与启动肾脏发育并发挥保护肾脏的作用。众多实验室和临床研究表明,急性肾损伤(AKI)时NGAL表达明显增高并分泌释放入体液中。尤其是尿液中的NGAL水平与肾脏损伤的程度密切相关且很早就表现出来,NGAL被认为是新的有效的AKI早期生化标志物。 展开更多
关键词 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 急性肾损伤 早期诊断
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人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白真核表达载体的构建和鉴定 预览
3
作者 何莹 罗阳 +2 位作者 王英翔 陈安 胡川闽 《国际检验医学杂志》 CAS 2013年第13期1633-1634,1637共3页
目的构建人NGAL重组蛋白真核表达载体并转染HEK293T细胞进行瞬间表达。方法从人白细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增NGAL基因并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/HisA中构建真核重组表达质粒pcDNA3.1/His A-NGAL,经测序鉴定正确后用脂质体转... 目的构建人NGAL重组蛋白真核表达载体并转染HEK293T细胞进行瞬间表达。方法从人白细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增NGAL基因并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/HisA中构建真核重组表达质粒pcDNA3.1/His A-NGAL,经测序鉴定正确后用脂质体转染HEK293T细胞,用Western blot和ELISA方法鉴定表达产物。结果获得长度597bp的NGAL蛋白基因并构建pcDNA3.1/His A-NGAL真核表达载体,测序正确后转染,用Western blot和ELISA方法证实HEK293T细胞可以表达NGAL重组蛋白并分泌出胞。结论成功构建人NGAL重组蛋白真核表达载体,转染HEK293T细胞表达出相应蛋白,为下一步的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 中性白细胞 载脂蛋白类 明胶酶类 逆转录聚合酶链反应 重组 遗传
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1种改良的高效单特异性兔多克隆抗体的制备方法 预览 被引量:5
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作者 钟丹 易维京 +1 位作者 李淑慧 胡川闽 《国际检验医学杂志》 CAS 2010年第4期 315-316,319,共3页
目的 建立1种改良的高效单特异性兔多克隆抗体的制备方法.方法 用RT-PCR方法获得bax保守N端1~123位氨基酸基因片段,并将其插入pET42a原核表达载体,诱导表达的Bax融合蛋白组合应用GST、His亲和层析技术获得免疫原(pET42a/Bax融合蛋白)... 目的 建立1种改良的高效单特异性兔多克隆抗体的制备方法.方法 用RT-PCR方法获得bax保守N端1~123位氨基酸基因片段,并将其插入pET42a原核表达载体,诱导表达的Bax融合蛋白组合应用GST、His亲和层析技术获得免疫原(pET42a/Bax融合蛋白),HPLC鉴定纯度达95%.利用改良快速免疫法获得人Bax兔多克隆抗体,并经蛋白A柱亲和层析技术,抗原亲和纯化技术获得高效价高特异性的抗体.间接ELISA检测抗体滴度、Western blot和免疫组化试验检测抗体特异性,并与商业化抗体进行对比.结果 通过快速免疫法得到人Bax兔多克隆抗体,经过Protein A柱纯化,再经抗原亲和纯化后,间接ELISA证明,抗体效价均达1∶51 200;Western blot显示,只有经过抗原亲和纯化后的抗体特异性高,无其他杂带;免疫组化证明,在原发性肝癌组织中,人Bax兔多克隆抗体能特异地和内源性Bax结合,其高效高特异性已达国外Santa Cruse公司 Bax商业化抗体水平.结论 快速免疫法与抗原亲和纯化相结合,获得人Bax高效单特异性兔多克隆抗体,建立了1种改良的高效单特异性兔多克隆抗体的制备方法. 展开更多
关键词 蛋白 快速免疫法 抗体 抗原
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p27基因启动子甲基化在乳腺癌中的研究 预览 被引量:2
5
作者 蔡瑜娇 杨桦 +1 位作者 李鹏 刘玲 《重庆医学》 CAS 北大核心 2009年第2期 136-138,141,共4页
目的探讨在乳腺癌中p27基因启动子甲基化的状态。方法采用免疫组织化学、原住杂交及RT-PCR的方法检测乳腺癌细胞株、45例乳腺癌组织p27在mRNA及蛋白水平的表达;用甲基化特异性PCR的方法检测乳腺癌组织中p27基因启动子甲基化状态。结果... 目的探讨在乳腺癌中p27基因启动子甲基化的状态。方法采用免疫组织化学、原住杂交及RT-PCR的方法检测乳腺癌细胞株、45例乳腺癌组织p27在mRNA及蛋白水平的表达;用甲基化特异性PCR的方法检测乳腺癌组织中p27基因启动子甲基化状态。结果p27低表达率为55.6%(25/45),一部分乳腺癌组织中p27的启动子区域存在高甲基化状态。结论p27启动子区域高甲基化状态可能是导致其在乳腺癌中低表达的机制之一。 展开更多
关键词 乳腺癌 P27 免疫组织化学 原位杂交 甲基化
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免疫学检测晚期氧化蛋白方法的建立及临床应用
6
作者 田梅 吴雄飞 +1 位作者 余荣杰 易维京 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS 北大核心 2009年第4期394-400,共7页
晚期氧化蛋白产物(advanced oxidation protein products,AOPPs)是Witko—Sarsat在1996年提出的作为慢性肾功能衰竭(chfinoc renal failure,CRF)患者氧化应激和促炎症介质的标志,是CRF患者免疫功能紊乱、动脉粥样硬化性、透析相... 晚期氧化蛋白产物(advanced oxidation protein products,AOPPs)是Witko—Sarsat在1996年提出的作为慢性肾功能衰竭(chfinoc renal failure,CRF)患者氧化应激和促炎症介质的标志,是CRF患者免疫功能紊乱、动脉粥样硬化性、透析相关性淀粉样变等CRF长期并发症发生过程中的重要致病环节。 展开更多
关键词 晚期氧化蛋白产物 酶联免疫吸附反应 单克隆抗体 肾功能不全
抗重组人乳腺珠蛋白单克隆抗体的制备及其特异性鉴定 预览 被引量:1
7
作者 刘秀娜 郭建秀 +1 位作者 罗羽 胡川闽 《重庆医学》 CAS 2008年第6期 603-604,607,I0001,F0002,共5页
目的通过杂交瘤技术获得特异性抗hMAM单克隆抗体.为进一步研制基于hMAM的乳腺癌早期诊断试剂盒奠定基础。方法以纯化的重组蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,运用杂交瘤技术制备、间接ELISA法及免疫组化法筛选出能稳定分泌特异性抗hMAM的单... 目的通过杂交瘤技术获得特异性抗hMAM单克隆抗体.为进一步研制基于hMAM的乳腺癌早期诊断试剂盒奠定基础。方法以纯化的重组蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,运用杂交瘤技术制备、间接ELISA法及免疫组化法筛选出能稳定分泌特异性抗hMAM的单克隆抗体细胞株。结果通过杂交瘤技术获得了2株能分泌特异性抗hMAM单克隆抗体的杂交瘤细胞株hMAM-A2及hMAM-B7,其分泌的单克隆抗体亚类均属于IgG1,Western blotting结果显示2株细胞分泌的单克隆抗体特异性强能与34kDa处的hMAM抗原形成单一的蛋白质显色务带,免疫组化结果显示其仅与乳腺癌组织呈阳性反应,与其他肿瘤组织不发生交叉反应。结论利用鼠-鼠杂交瘤技术成功的制备了2株稳定分泌高效价、高特异性抗hMAM的杂交瘤细胞株。 展开更多
关键词 人乳腺珠蛋白 乳腺癌 杂交瘤技术 单克隆抗体
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乳腺癌转移细胞检测的研究进展 预览
8
作者 刘秀娜(综述) 郭建秀(综述) +1 位作者 胡川闽(审校) 王仙园(审校) 《国际检验医学杂志》 CAS 2006年第12期 1117-1119,1122,共4页
乳腺癌的发病率呈上升趋势,亟待研究开发针对乳腺癌的新的快速、简单、准确的检测手段。研究已经证实淋巴结与骨髓作为乳腺癌细胞早期转移部位。乳腺癌患者淋巴结与骨髓中肿瘤转移细胞的检测对于临床治疗有一定的指导意义,但也存在一... 乳腺癌的发病率呈上升趋势,亟待研究开发针对乳腺癌的新的快速、简单、准确的检测手段。研究已经证实淋巴结与骨髓作为乳腺癌细胞早期转移部位。乳腺癌患者淋巴结与骨髓中肿瘤转移细胞的检测对于临床治疗有一定的指导意义,但也存在一些明显的缺点。近年来血液中乳腺癌细胞标志物的研究日益受到重视。许多新的乳腺癌标志物被用于血液中乳腺癌细胞的检测,由于血液标本的取材较淋巴结与骨髓容易,便于常规的乳腺癌筛查及随访。具有更大的临床应用价值。现就乳腺癌患者淋巴结、骨髓及血液中转移肿瘤细胞的各种检测方法的优劣及血液乳腺癌转移细胞检测指标的研究现状作一综述。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 肿瘤转移 肿瘤标记 生物学
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人乳腺珠蛋白基因亚型的原核表达及纯化 预览 被引量:2
9
作者 刘秀娜 潘自铁 +3 位作者 王仙园 周娟 赵力军 胡川闽 《医学研究生学报》 CAS 2006年第2期 107-110,共4页
目的:克隆人乳珠蛋白(hMAM)编码全长cDNA,原核表达并纯化蛋白产物,为后期研制乳腺癌早期诊断试剂盒奠定基础。方法:自乳腺癌组织及乳腺癌细胞株MD-MB453提取总RNA,通过RT-PCR克隆hMAMcD-NA,构建pQF40-hMAM表达质粒,在大肠杆菌... 目的:克隆人乳珠蛋白(hMAM)编码全长cDNA,原核表达并纯化蛋白产物,为后期研制乳腺癌早期诊断试剂盒奠定基础。方法:自乳腺癌组织及乳腺癌细胞株MD-MB453提取总RNA,通过RT-PCR克隆hMAMcD-NA,构建pQF40-hMAM表达质粒,在大肠杆菌M15中表达,利用镍.亚硝胺乙酸组氨酸(Ni-NTA-His)亲和层析法对重组蛋白进行纯化。结果:乳腺癌组织和乳腺癌细胞株中发现两种hMAM cDNA亚型,即hMAM和hMAM(Isoform),长度分别为279和270bp,两者相差9个连续碱基,其翻译产物相差3个连续氨基酸残基;表达的融合蛋白以不溶性包涵体形式存在,纯化后得到纯度为97%的目的蛋白。结论:获得hMAM cDNA并发现一个新的hMAM突变体;融合蛋白的表达及纯化成功。 展开更多
关键词 乳腺癌 人乳腺珠蛋白 原核表达系统 蛋白纯化
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IRF-4结合蛋白——一个新的Th2极性分化相关分子 预览 被引量:2
10
作者 周玉 胡川闽 《免疫学杂志》 CAS 北大核心 2006年第5期 580-583,共4页
Th细胞的极性分化在免疫反应调控中具有重要作用,Th细胞极化失调所致Th1/Th2失衡与多种疾病的发生相关。对于细胞因子、抗原信号,转录因子等影响Th1/Th2分化倾向的相关调控因素的研究已比较深入,但分化的具体分子机制尚未完全阐明... Th细胞的极性分化在免疫反应调控中具有重要作用,Th细胞极化失调所致Th1/Th2失衡与多种疾病的发生相关。对于细胞因子、抗原信号,转录因子等影响Th1/Th2分化倾向的相关调控因素的研究已比较深入,但分化的具体分子机制尚未完全阐明。IRF-4结合蛋白(IBP)是一个新发现的与Th活化及Th2极性分化相关的分子,它的发现为Th极化的分子机制的研究提供了新的线索。本文就IBP的发现及其在Th细胞极化中的作用做一综述。 展开更多
关键词 IBP TH TH2 极性分化
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乳腺癌相关分子hMAM的临床应用 预览
11
作者 胡川闽 刘秀娜 王仙园 《国外医学:肿瘤学分册》 2005年第7期 533-536,共4页
人乳腺珠蛋白(hMAM)为近几年发现的一种乳腺组织特异性蛋白,其基因仅在乳腺癌中表达,可能是首次发现的具有乳腺器官特异性的肿瘤标志物.该标志物的确认无疑会对乳腺癌的诊治等方面带来突破性进展.目前国内外学者对hMAM的表达及其与乳腺... 人乳腺珠蛋白(hMAM)为近几年发现的一种乳腺组织特异性蛋白,其基因仅在乳腺癌中表达,可能是首次发现的具有乳腺器官特异性的肿瘤标志物.该标志物的确认无疑会对乳腺癌的诊治等方面带来突破性进展.目前国内外学者对hMAM的表达及其与乳腺癌的关系做了大量研究,提出了许多新的思路及线索.现对其在乳腺癌中的早期诊断、治疗、监测病程转移及复发中的研究进展进行综述. 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 珠蛋白 诊断 治疗 复发
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人乳腺珠蛋白的研究进展 预览 被引量:3
12
作者 潘自铁 胡川闽 《国外医学:临床生物化学与检验学分册》 2004年第3期 249-251,共3页
人乳腺珠蛋白(hMAM)为乳腺组织特异性蛋白,是一种新的可能具有临床应用前景的乳腺癌标志物.近几年国内外研究者对hMAM在乳腺、淋巴结、外周血和骨髓中的表达及其与乳腺癌的关系做了大量工作,结果不尽相同,提出了不同的观点.现对hMAM及... 人乳腺珠蛋白(hMAM)为乳腺组织特异性蛋白,是一种新的可能具有临床应用前景的乳腺癌标志物.近几年国内外研究者对hMAM在乳腺、淋巴结、外周血和骨髓中的表达及其与乳腺癌的关系做了大量工作,结果不尽相同,提出了不同的观点.现对hMAM及其基因在乳腺癌检测中的研究现状作一综述. 展开更多
关键词 人乳腺珠蛋白 HMAM 乳腺组织 恶性肿瘤 生物学
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苦参碱诱导人肝癌细胞分化、凋亡时对G1细胞周期调节因子的调控 预览 被引量:83
13
作者 司维柯 高利宏 +3 位作者 刘斌 陈安 李鹏 姚婕 《癌症:英文版》 SCIE CAS 北大核心 2001年第8期 848-851,共4页
目的:观察苦参碱诱导人肝癌细胞分化、凋亡时, G1细胞周期调节因子的变化,探讨苦参碱对肿瘤细胞增殖的调控。方法: 0、 0.3、 0.8、 1.5 g/L苦参碱作用 HepG2细胞 3天,免疫组化检测 p53、 Rb、 p21、 p27、 p16、 cyclin D1蛋白表... 目的:观察苦参碱诱导人肝癌细胞分化、凋亡时, G1细胞周期调节因子的变化,探讨苦参碱对肿瘤细胞增殖的调控。方法: 0、 0.3、 0.8、 1.5 g/L苦参碱作用 HepG2细胞 3天,免疫组化检测 p53、 Rb、 p21、 p27、 p16、 cyclin D1蛋白表达;原位杂交检测 p53、 cyclin D1mRNA的表达。真彩色图像分析对基因表达强弱进行定量,结果用 Microsoft-Excel软件统计处理。结果:用药后细胞周期负调控因子 p53、 Rb、 p21、 p27、 p16表达增强;正调控因子 cyclin D1表达减弱。结论:苦参碱诱导人肝癌细胞 HepG2分化、凋亡的机制可能与苦参碱上调了 G1细胞周期负调节因子的表达,下调了 G1期正调节因子 cyclin D1表达有关。 展开更多
关键词 苦参碱 肝细胞癌 细胞周期 调节因子 细胞凋亡 细胞调控
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多媒体和网络技术与现代医学教育 预览 被引量:23
14
作者 陈安 刘盛华 《西北医学教育》 2000年第2期 89-90,共2页
多媒体和网络技术在现代医学教育中主要有计算机化考试与学籍管理、多媒体软件教学、等应用形式。其应用在增教学效果,充分利用教学资源等方面有明显的优势,在发展中尚存在观念转变、经费投入和相关人才培养等问题。
关键词 多媒体 医学教育 网络技术
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TNF的研究进展 预览 被引量:8
15
作者 吴治芬 刘斌 《免疫学杂志》 CAS 北大核心 1997年第2期 138-139,共2页
TNF的研究进展吴治芬1刘斌1综述朱锡华2审阅肿瘤坏死因子(TNF)和淋巴细胞毒素〈LT〉是因它们具有抗肿瘤活性或作为细胞损伤因子而分别发现的。当将它们作为抗肿瘤剂而用于临床时,则有其难于克服的严重副作用。与此相反,... TNF的研究进展吴治芬1刘斌1综述朱锡华2审阅肿瘤坏死因子(TNF)和淋巴细胞毒素〈LT〉是因它们具有抗肿瘤活性或作为细胞损伤因子而分别发现的。当将它们作为抗肿瘤剂而用于临床时,则有其难于克服的严重副作用。与此相反,在机体的防卸功能方面,二者作为免疫... 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子 受体 研究进展
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抑瘤素M的研究进展 被引量:4
16
作者 金晓琳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS 1997年第A02期 31-33,共3页
抑瘤素M(OSM)是与IL-6,IL-11、白血病抑制因子、睫状神经营养因子(CNTF)及心肌营养因子-1(CT-1)同为一个家族的细胞因子。本文综述了近年有关OSM的研究进展。
关键词 抑瘤素M 受体 信号传导 结构特征 生物学活性
基因疫苗——疫苗的新希望 预览
17
作者 郭华阳 董燕麟 《国外医学:临床生物化学与检验学分册》 1996年第1期 35-37,共3页
近几年发展起来的基因免疫接种技术导致了基因疫苗的庭生,基因疫苗既具有重组亚单位疫苗的安全性,双具有减毒活疫苗诱导全方位免疫应签的高效力,在病毒感染性疾病和肿瘤等的防治中有着广阔的应用前景本文对基因疫苗的庭生、作用机理... 近几年发展起来的基因免疫接种技术导致了基因疫苗的庭生,基因疫苗既具有重组亚单位疫苗的安全性,双具有减毒活疫苗诱导全方位免疫应签的高效力,在病毒感染性疾病和肿瘤等的防治中有着广阔的应用前景本文对基因疫苗的庭生、作用机理和优点等作一简述。 展开更多
关键词 疫苗 基因疫苗 基因免疫接种
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下丘脑.腺垂体.性腺轴内分泌调节控制系统的数理模型 预览
18
作者 杨林 刘秉正 叶治家 《生物医学工程学杂志》 CAS 北大核心 1991年第2期 143-148,共6页
本文对下丘脑、腺垂体、性腺(男性)的轴内分泌调节控制系统提出了一个数理模型,用非线性微分方程组定量地描述了促性腺释放激素(LHRH)、促黄体素(LH)和雄激素(T)三者之间的相互调节作用。在建立模型中,考虑了T分别对LH、LHRH分泌的负反... 本文对下丘脑、腺垂体、性腺(男性)的轴内分泌调节控制系统提出了一个数理模型,用非线性微分方程组定量地描述了促性腺释放激素(LHRH)、促黄体素(LH)和雄激素(T)三者之间的相互调节作用。在建立模型中,考虑了T分别对LH、LHRH分泌的负反馈和LH对LHRH分泌的负反馈作用。同时也考虑了LHRH、LH分别激活LH、T的分泌的饱和效应,以及T的自主分泌。利用实验数据确定模型方程中的系数,并将模型数值计算结果与实验比较。结果证明;在注入LHRH后,各激素的反应曲线和激素的周期脉冲分泌等方面与实验吻合较好。 展开更多
关键词 数理模型 内分泌调节 下丘脑
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第九届全国高等医药院校临床生物化学专业组会议暨教学研讨会纪要 预览
19
《检验医学教育》 2006年第4期 5,共1页
第九届全国高等医药院校临床生化专业组会议暨教学研讨会,于2006年9月27日至29日在重庆市召开。来自重庆医科大学、上海交通大学、江苏大学医学技术学院、第三军医大学、温州医学院、武汉大学、中南大学湘雅医学院、广东佛山科学技术... 第九届全国高等医药院校临床生化专业组会议暨教学研讨会,于2006年9月27日至29日在重庆市召开。来自重庆医科大学、上海交通大学、江苏大学医学技术学院、第三军医大学、温州医学院、武汉大学、中南大学湘雅医学院、广东佛山科学技术学院医学院、四川大学华西临床医学院、河北北方学院、广东医学院、广州医学院、福建医科大学、河南大学、南通大学、贵阳医学院、成都医学院、湖南湘南学院、四川卫生干部管理学院、太原山西职工医学院共20家单位的315名专家代表参加了会议。 展开更多
关键词 高等医药院校 教学研讨会 临床生物化学 专业组 研讨会纪要 会议 中南大学湘雅医学院 温州医学院
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提高英特网英语听说能力 预览
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作者 刘斌 张献 《语言教育》 2002年第7期47-48,共2页
随着改革开放的深入、我国申办2008年夏季奥运会的成功以及正式加入世界贸易组织(WTO)等一系列振奋人心的事件,神州大地又迅速掀起了一股学习英语的热潮。在这次的热潮中群众基础非常广泛,有报纸报道,甚至北京街坊老太太也学着说几句“... 随着改革开放的深入、我国申办2008年夏季奥运会的成功以及正式加入世界贸易组织(WTO)等一系列振奋人心的事件,神州大地又迅速掀起了一股学习英语的热潮。在这次的热潮中群众基础非常广泛,有报纸报道,甚至北京街坊老太太也学着说几句“Hello”,“How do you do”什么的。 展开更多
关键词 英语听说能力 报纸报道 夏季奥运会 标准英语 慢速英语 新概念英语 四级 课堂教学 外国客人 国际新闻
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