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盐单胞菌S62 β-半乳糖苷酶合成低聚半乳糖的研究 预览
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作者 朱五二 缪明永 +3 位作者 顾正华 李由然 丁重阳 石贵阳 《生物加工过程》 CAS 2019年第2期131-137,共7页
以盐单胞菌S62 β-半乳糖苷酶为研究对象,探究其合成低聚半乳糖效率。为了提高低聚半乳糖产率,对反应条件进行了优化,并以反应温度、pH、加酶量、底物浓度为考察对象进行正交试验,得到最优反应条件:反应温度40℃,pH 7.0,加酶量50 U/mL,... 以盐单胞菌S62 β-半乳糖苷酶为研究对象,探究其合成低聚半乳糖效率。为了提高低聚半乳糖产率,对反应条件进行了优化,并以反应温度、pH、加酶量、底物浓度为考察对象进行正交试验,得到最优反应条件:反应温度40℃,pH 7.0,加酶量50 U/mL,底物质量浓度300 g/L。反应6 h时可获得最大低聚半乳糖产率(41.91±0.27)%,乳糖消耗率为(82.47±0.38)%。反应4~8 h内低聚半乳糖产率都维持在40%以上,此时乳糖消耗率均在80%以上,在提高乳糖利用率的同时实现了低聚半乳糖的高产,有利于降低生产成本,为低温S62 β-半乳糖苷酶工业化应用奠定了基础。 展开更多
关键词 Β-半乳糖苷酶 低聚半乳糖产率 乳糖消耗率 盐单胞菌
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创新生物化学与分子生物学教学实践的策略探析 预览
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作者 胡波 王梁华 +2 位作者 刘小宇 黄才国 焦炳华 《求知导刊》 2019年第3期80-81,共2页
随着近代医学的快速发展,新时期对医学院的学生也提出了更高的要求。基于此,探析生物化学与分子生物学教学的创新具有非常重要的现实意义。文章阐述了生物化学与分子生物学的重要性,分析了当前阶段课程教学存在的问题,并提出创新生物化... 随着近代医学的快速发展,新时期对医学院的学生也提出了更高的要求。基于此,探析生物化学与分子生物学教学的创新具有非常重要的现实意义。文章阐述了生物化学与分子生物学的重要性,分析了当前阶段课程教学存在的问题,并提出创新生物化学与分子生物学教学实践的策略,希望对提升学生综合能力有积极作用。 展开更多
关键词 创新 生物化学与分子生物学 教学实践
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基于超滤膜辅助的糖蛋白全O-连接糖链的富集和MALDI-TOF/TOF质谱结构解析 被引量:2
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作者 武艳丽 杨刚龙 +1 位作者 缪明永 关锋 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2017年第1期70-79,共10页
哺乳动物中约有50%以上的蛋白质都发生了糖基化修饰.连接在丝氨酸或苏氨酸上的O-连接糖链是常见的蛋白质糖基化修饰方式之一,其主要功能是维持与其连接的蛋白质部分的空间构象,保护其免受蛋白酶水解及覆盖某些抗原决定簇.糖链结构... 哺乳动物中约有50%以上的蛋白质都发生了糖基化修饰.连接在丝氨酸或苏氨酸上的O-连接糖链是常见的蛋白质糖基化修饰方式之一,其主要功能是维持与其连接的蛋白质部分的空间构象,保护其免受蛋白酶水解及覆盖某些抗原决定簇.糖链结构的解析有助于更清楚地认识糖蛋白及其功能.本研究建立了一种基于超滤膜辅助(FASP)富集细胞、血清和尿液中糖蛋白全β连接糖链的方法,根据糖蛋白与其糖链结构之间的分子质量差异,利用10KD超滤膜富集蛋白质样品中由β消除反应释放的全O-连接糖链,将糖链甲基化修饰后再使用MALDI-TOF/TOF-MS进行解析,同时利用二级质谱进行结构确认.通过上述方法可从标准糖蛋白mucin、细胞、血清和尿液样本中分别鉴定到83、29、33和85种O-连接糖链结构,利用该方法可以从复杂样品中富集和解析糖蛋白全O-连接糖链,实现快速、高效、高通量地解析糖蛋白O-连接糖链的目的. 展开更多
关键词 O-连接糖链 糖组学 超滤膜辅助(FASP) MALDI—TOF/TOF—MS
抗肿瘤药物热门靶点研究进展 被引量:1
4
作者 庞琳 杨生生 《生命的化学》 CAS CSCD 2017年第2期217-221,共5页
肿瘤治疗是人类致力攻克的难题之一,近年来靶向药物正以其低毒副作用、疗效强、特异性较高等优点成为抗肿瘤药物研发的主流,但抗肿瘤靶向药物仍然存在停研率高、靶点重复、基础研究不深入、创新性不足等问题,本文分类阐述了传统抗肿瘤... 肿瘤治疗是人类致力攻克的难题之一,近年来靶向药物正以其低毒副作用、疗效强、特异性较高等优点成为抗肿瘤药物研发的主流,但抗肿瘤靶向药物仍然存在停研率高、靶点重复、基础研究不深入、创新性不足等问题,本文分类阐述了传统抗肿瘤药物、激酶抑制剂、免疫检查点阻滞剂、组蛋白去乙酰化酶抑制剂、聚ADP核糖聚合酶抑制剂等的作用靶点及获批、在研药物的情况,以期为靶向药物研发提供思路。 展开更多
关键词 抗肿瘤药 靶点 单克隆抗体 小分子
抗体偶联药物设计及临床研究进展
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作者 王钰洁 曹鑫 +3 位作者 刘小宇 卢小玲 李玉艳 焦炳华 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1209-1216,共8页
抗体偶联药物由单克隆抗体、连接基和细胞毒性药物组成,兼具化疗药物和抗体药物各自的优点,是一种新型靶向肿瘤治疗药物,极具发展潜力。本文总结了近年来抗体偶联药物研究领域的重要研究进展,归纳了近期处于临床各阶段的ADCs药物及其特... 抗体偶联药物由单克隆抗体、连接基和细胞毒性药物组成,兼具化疗药物和抗体药物各自的优点,是一种新型靶向肿瘤治疗药物,极具发展潜力。本文总结了近年来抗体偶联药物研究领域的重要研究进展,归纳了近期处于临床各阶段的ADCs药物及其特点,并对最新的临床研究进展进行了简要评述。 展开更多
关键词 抗体偶联药物 抗肿瘤 靶向治疗 单克隆抗体 定向偶联
静息细胞转化北沙参中总香豆素的研究
6
作者 董奇 薛佳兴 +5 位作者 卢忠华 王爽 刘小宇 焦炳华 郑珩 卢小玲 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2016年第2期41-50,共10页
目的优化极地真菌S-3-66-E1转化北沙参中总香豆素的条件。方法采用静息细胞转化法,考察了生物转化条件(菌体密度、底物浓度、温度、pH、摇床转速、金属离子)对转化体系的影响,并通过正交实验优化工艺参数,利用HPLC检测总香豆素的转化... 目的优化极地真菌S-3-66-E1转化北沙参中总香豆素的条件。方法采用静息细胞转化法,考察了生物转化条件(菌体密度、底物浓度、温度、pH、摇床转速、金属离子)对转化体系的影响,并通过正交实验优化工艺参数,利用HPLC检测总香豆素的转化情况。结果确定摇瓶转化的最优条件:培养温度15℃,摇床转速240r/min,菌体密度60g·L^-1,底物浓度0.1g·L^-1,pH值5.9,转化时间24h,在此条件下总香豆素的转化量趋近完全。结论采用静息细胞法转化北沙参中总香豆素的工艺稳定可行。 展开更多
关键词 静息细胞 生物转化 香豆素
新型海洋源β-半乳糖苷酶在毕赤酵母中的表达与酶学性质 预览
7
作者 阎金勇 董敬霞 +3 位作者 査根晗 高云 刘小宇 缪明永 《生物加工过程》 CAS 2016年第4期33-36,共4页
从海洋环境β-半乳糖苷酶基因出发,采用毕赤酵母表达体系,构建产β-半乳糖苷酶的基因工程菌,并对重组酶酶学性质进行表征。结果发现:海洋源β-半乳糖苷酶具有优良的乳制品用酶特性,该重组酶的最适pH为7.0-8.0,最适温度为45℃,在50℃以... 从海洋环境β-半乳糖苷酶基因出发,采用毕赤酵母表达体系,构建产β-半乳糖苷酶的基因工程菌,并对重组酶酶学性质进行表征。结果发现:海洋源β-半乳糖苷酶具有优良的乳制品用酶特性,该重组酶的最适pH为7.0-8.0,最适温度为45℃,在50℃以下孵育1 h可保持55%以上的活力,能耐受Fe^2+、Na^2+、K^2+、Ca^2+等多种金属离子。宽广的pH、温度、金属离子稳定性,以及低温活性赋予该酶良好的乳制品用酶特性。 展开更多
关键词 半乳糖苷酶 毕赤酵母 重组
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膜联蛋白A2在自身免疫性疾病中的作用 被引量:2
8
作者 易君 彭定发 +1 位作者 王凯慧 王梁华 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1092-1096,共5页
膜联蛋白A2(AXⅡ)在自身免疫性疾病中往往高表达,并可作为自身抗体——抗AXⅡ抗体的靶点而起作用。在抗磷脂抗体综合症中,内皮细胞上的β2糖蛋白-1结合AXⅡ,利用Toll样受体-4作为共受体,通过特异性结合抗磷脂抗体/抗β2糖蛋白-1抗体... 膜联蛋白A2(AXⅡ)在自身免疫性疾病中往往高表达,并可作为自身抗体——抗AXⅡ抗体的靶点而起作用。在抗磷脂抗体综合症中,内皮细胞上的β2糖蛋白-1结合AXⅡ,利用Toll样受体-4作为共受体,通过特异性结合抗磷脂抗体/抗β2糖蛋白-1抗体触发细胞内信号通路,从而诱导炎性反应或血栓形成。狼疮性肾炎的抗ds-DNA抗体依赖AXⅡ结合肾小球系膜细胞后,进入细胞质和细胞核,激活p38 MAPK、JNK、AKT通路,诱导IL-6分泌和AXⅡ合成,形成恶性循环而不断加剧肾炎进展。类风湿关节炎患者滑膜组织中的AXⅡ高表达,a AXⅡ呈高水平。可见,AXⅡ通过不同的途径参与了自身免疫性疾病的多个致病环节:1)与自身抗体的抗原相互结合,并且促进炎性细胞因子表达及病理变化;2)直接与自身抗体结合,介导信号通路的激活,从而诱导炎症因子的分泌。 展开更多
关键词 自身免疫性疾病 膜联蛋白A2 狼疮性肾炎 抗磷脂抗体综合症 类风湿关节炎
海胆壳多糖的提取及PMP柱前衍生化高效液相分析 被引量:4
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作者 商晓慧 曲晨龙 +4 位作者 张建鹏 刘小宇 焦炳华 郑珩 卢小玲 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期830-832,共3页
目的建立海胆壳多糖提取工艺及柱前衍生化条件。方法水提醇沉法提取壳多糖,采用正交实验优化提取工艺;柱前衍生化后,利用高效液相色谱法检测单糖组分,对海胆壳多糖的脾淋巴细胞免疫抑制活性实验进行了初步探索。结果海胆壳多糖最佳提取... 目的建立海胆壳多糖提取工艺及柱前衍生化条件。方法水提醇沉法提取壳多糖,采用正交实验优化提取工艺;柱前衍生化后,利用高效液相色谱法检测单糖组分,对海胆壳多糖的脾淋巴细胞免疫抑制活性实验进行了初步探索。结果海胆壳多糖最佳提取工艺为15倍的水,70℃水浴回流1 h,提取3次;100μl壳多糖水解液,加入50 ml Na OH(0.2 mol·L^-1),40μl l-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(0.5 mol·L^-1),混匀后70℃水浴30 min,取出冷却,加入50μl HCl(0.2 mol·L^-1)中和,200μl氯仿萃取3次。药理学实验表明海胆壳多糖溶液在浓度1-10μg·ml^-1范围时显示出一定的免疫活性。结论本次实验成功建立海胆壳多糖的提取工艺和衍生化条件。 展开更多
关键词 光棘球海胆 壳多糖 正交实验 衍生化 高效液相色谱
过表达缺氧诱导因子-1α的结直肠癌裸鼠可视化模型的建立 被引量:1
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作者 李喆 叶小磊 +4 位作者 杨生生 殷佩浩 胡送娇 陈磊 房林 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期246-251,共6页
目的:建立一种荧光可视化显像且稳定过表达缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)的裸鼠结直肠癌移植瘤模型。方法:对不同的人结直癌细胞系(SW480、SW620、LOVO及HCT116细胞)用缺氧诱导剂Co Cl2处理,根据HIF-1α被诱... 目的:建立一种荧光可视化显像且稳定过表达缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)的裸鼠结直肠癌移植瘤模型。方法:对不同的人结直癌细胞系(SW480、SW620、LOVO及HCT116细胞)用缺氧诱导剂Co Cl2处理,根据HIF-1α被诱导表达的情况选择合适的靶细胞;将HIF-1α的c DNA序列克隆至慢病毒表达质粒p LV-TRC-EGFP,构建p LVHIF1α-EGFP慢病毒表达质粒,并包装过表达HIF-1α的慢病毒颗粒Lenti-HIF1α-EGFP。将Lenti-HIF1α-EGFP感染SW480细胞,嘌呤霉素筛选稳定过表达HIF-1α的细胞株SW480HIF-1α,Western blotting检测SW480HIF-1α细胞内HIF-1α及其下游蛋白VEGF、M1型丙酮酸激酶(pyruvate kinase expression M1,PKM1)的表达情况,Transwell实验检测其迁移能力。裸鼠腹腔注射SW480HIF-1α建立结直肠癌移植瘤模型,倒置荧光显微镜观察裸鼠腹腔移植瘤结节。结果:常氧条件下4种结直肠癌细胞均不表达HIF-1α,经Co Cl2诱导后,除SW480细胞系以外的细胞均可被诱导表达HIF-1α,故选择SW480细胞作为研究靶细胞。成功构建稳定过表达HIF-1α的细胞株SW480HIF-1α,SW480HIF-1α细胞内HIF-1α、VEGF和PKM1的表达水平均高于野生型SW480细胞,其迁移能力较野生型SW480细胞显著增强[观察视野内迁移细胞数:(250±11)vs(50±5)个,P<0.01]。SW480HIF-1α组裸鼠肠壁形成肿瘤结节数量显著多于SW480组[(15±4)vs(4±1)个,P<0.05]。结论:成功建立了高表达HIF-1α的荧光可视化裸鼠移植瘤模型,为进一步的相关功能学研究以及药物筛选提供条件。 展开更多
关键词 结直肠癌 移植瘤模型 稳定转染 慢病毒 缺氧诱导因子-1Α 绿色荧光蛋白
肿瘤状态下骨骼肌异常代谢 预览
11
作者 缪明永 《肿瘤代谢与营养电子杂志》 2015年第2期1-7,共7页
<正>人体肌肉组织可分为骨骼肌、平滑肌和心肌三种,其中骨骼肌含量最多,约占体重的40%(男性)和30%(女性)。因此,骨骼肌是机体最大的蛋白库,在某些特殊情况下(如长期饥饿等)骨骼肌又是机体的能量库。肿瘤患者,尤其是伴有恶液质的... <正>人体肌肉组织可分为骨骼肌、平滑肌和心肌三种,其中骨骼肌含量最多,约占体重的40%(男性)和30%(女性)。因此,骨骼肌是机体最大的蛋白库,在某些特殊情况下(如长期饥饿等)骨骼肌又是机体的能量库。肿瘤患者,尤其是伴有恶液质的肿瘤晚期患者可出现脂肪组织和骨骼肌不断分解消耗,持续体重下降和消瘦。其中骨骼肌持续消耗对患者生命活动和生活质量产生严重影响,直 展开更多
关键词 骨骼肌萎缩 恶液质 蛋白酶体 异常代谢 肿瘤晚期 蛋白质合成 能量库 肿瘤病 脂肪组织 抑制素
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两株极地真菌次级代谢产物的研究 预览
12
作者 闫凝星 方莎莎 +3 位作者 刘靖堂 卢小玲 刘小宇 焦炳华 《极地研究》 CAS CSCD 2015年第3期319-325,共7页
采用硅胶柱层析、凝胶柱层析和HPLC等色谱技术,对极地真菌Articulosporasp.Z1—1和Penicilliumsp.S-1—10的发酵液提取物进行分离纯化,共得到9个化合物,通过理化性质及波谱学分析并与相关文献比对,确定化合物结构为3,7-二羟基-9... 采用硅胶柱层析、凝胶柱层析和HPLC等色谱技术,对极地真菌Articulosporasp.Z1—1和Penicilliumsp.S-1—10的发酵液提取物进行分离纯化,共得到9个化合物,通过理化性质及波谱学分析并与相关文献比对,确定化合物结构为3,7-二羟基-9-甲氧基-1-甲基-苯并[c]色烯-6-酮(1),1,4-二羟基甲苯(2),间羟基苄醇(3),对羟基苯乙醇(4),邻苯二甲酸二丁酯(5),1,7-二羟基-3-羟甲基-8-甲氧基一二苯并[b,e]氧杂卓-13,14-二酮(6),邻苯二甲酸二(2·乙基己)酯(7),4.十三烷基-苯甲醛(8)和(z)-7-十四烯酸(9)。其中,化合物1-6首次从Articulosporasp.属真菌中获得,化合物8为新天然产物。化合物1和4被证明具有抑制稻瘟霉的作用,化合物2有较好的抗菌和细胞毒活性,化合物3有较强的抗氧化活性。 展开更多
关键词 极地真菌 节枝孢属 青霉属次级代谢产物 生物学活性
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支链脂肪酸酯 预览
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作者 陈贤为 徐枢枢 +2 位作者 赵越超 缪明永 石汉平 《肿瘤代谢与营养电子杂志》 2015年第4期25-28,共4页
<正>一些数据显示肥胖即将成为世界性健康问题,因为肥胖与胰岛素抵抗,2型糖尿病(type 2 diabetes,T2D),高血压、高血脂、冠心病,以及癌症等密切相关。如何防治肥胖及其相关疾病已成为亟待解决的重大课题。研究表明脂肪细胞代谢紊... <正>一些数据显示肥胖即将成为世界性健康问题,因为肥胖与胰岛素抵抗,2型糖尿病(type 2 diabetes,T2D),高血压、高血脂、冠心病,以及癌症等密切相关。如何防治肥胖及其相关疾病已成为亟待解决的重大课题。研究表明脂肪细胞代谢紊乱与肥胖以及肥胖相关性疾病的发生和发展密切相关。因此,开展不同条件下脂肪细胞代谢变化规律及机制的研究将有助于阐明肥胖和肥胖相关疾病的机制。2014年Yore MM等[1]通过选择性 展开更多
关键词 脂肪酸酯 胰岛素抵抗 相关性疾病 性健康问题 细胞代谢 脂肪细胞 脂肪组织 代谢变化 脂类 葡萄糖刺激
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植物多糖抗衰老作用的研究进展 预览 被引量:5
14
作者 毛宇奇 张建鹏 《生物技术通讯》 CAS 2014年第4期588-590,共3页
植物中存在许多天然活性多糖。由于生长环境不同,不同植物的多糖在结构和组成上有明显差异,但不同来源的植物多糖却具有相似的生物学活性,比如调节机体免疫功能、抑制肿瘤、抗衰老、抗病毒、降血脂、降血糖、抗氧化等。植物多糖抗衰... 植物中存在许多天然活性多糖。由于生长环境不同,不同植物的多糖在结构和组成上有明显差异,但不同来源的植物多糖却具有相似的生物学活性,比如调节机体免疫功能、抑制肿瘤、抗衰老、抗病毒、降血脂、降血糖、抗氧化等。植物多糖抗衰老机制已成为植物多糖生物学活性研究中的热点之一。我们简要综述了国内外植物多糖抗衰老作用的研究进展。 展开更多
关键词 植物多糖 抗衰老 自由基 超氧化物歧化酶 谷胱甘肽过氧化物酶 端粒酶
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北极真菌Eutypellasp.D-1中海松烷二萜类化合物的研究 预览 被引量:3
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作者 刘靖堂 卢小玲 +2 位作者 郑珩 刘小宇 焦炳华 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期56-59,共4页
采用硅胶柱、反相硅胶柱和凝胶柱等色谱技术,从北极真菌Eutypellasp.的菌体发酵液提取物中分离纯化得到2个化合物,通过1H和13CNMR、2DNMR等分析方法,并比较相关文献,鉴定这两个化合物为libertellen-oneC(1)和libertellenoneA(2... 采用硅胶柱、反相硅胶柱和凝胶柱等色谱技术,从北极真菌Eutypellasp.的菌体发酵液提取物中分离纯化得到2个化合物,通过1H和13CNMR、2DNMR等分析方法,并比较相关文献,鉴定这两个化合物为libertellen-oneC(1)和libertellenoneA(2)。测试了化合物1和2对各种癌细胞株的细胞毒活性,其中化合物1对胰腺癌SW1990和胶质瘤U251有一定的细胞毒活性,此外化合物2对稻瘟霉有抑制活性。 展开更多
关键词 北极真菌 弯孢聚壳菌属 次级代谢产物 海松烷二萜类
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北沙参中香豆素类与聚炔类成分的含量测定研究 被引量:1
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作者 冯子晋 卢小玲 +4 位作者 张建鹏 商晓慧 刘小宇 焦炳华 郑珩 《中国海洋药物》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期20-26,共7页
目的建立同时测定北沙参中香豆素及聚炔类成分含量的方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱Agilent SB-C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相A相为水溶液,B相为乙腈,梯度洗脱,流速为1.0mL/min,柱温30℃,紫外检测波长250nm,进样量20μL。... 目的建立同时测定北沙参中香豆素及聚炔类成分含量的方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱Agilent SB-C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相A相为水溶液,B相为乙腈,梯度洗脱,流速为1.0mL/min,柱温30℃,紫外检测波长250nm,进样量20μL。结果香豆素及聚炔类成分的含量在不同产地的北沙参中具有明显的差异。结论本方法快速、准确、重复性好,可用于北沙参中香豆素及聚炔类成分的含量测定。 展开更多
关键词 北沙参 高效液相色谱法 含量测定
去乙酰化酶SIRT3与肿瘤代谢 预览 被引量:1
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作者 汪晓强 缪明永 《中华普通外科学文献(电子版)》 2014年第1期53-57,共5页
SIRT3是线粒体内一种重要的去乙酰化酶,对协调线粒体内复杂的代谢反应起关键作用。在抑制肿瘤发生方面,SIRT3通过抗肿瘤代谢再编程保护正常细胞而避免向肿瘤细胞转化和肿瘤发生。SIRT3调节细胞对葡萄糖的摄取,增加细胞抗氧化能力,... SIRT3是线粒体内一种重要的去乙酰化酶,对协调线粒体内复杂的代谢反应起关键作用。在抑制肿瘤发生方面,SIRT3通过抗肿瘤代谢再编程保护正常细胞而避免向肿瘤细胞转化和肿瘤发生。SIRT3调节细胞对葡萄糖的摄取,增加细胞抗氧化能力,提高电子传递链中复合体的活性,促进细胞内NADPH的生成,控制能量产生等,从多层次和多角度实现抗肿瘤代谢再编程。这对临床肿瘤诊断和治疗有一定的理论指导,并为肿瘤治疗提供新的策略和方法。 展开更多
关键词 SIRT3 肿瘤代谢再编程 线粒体 去乙酰化酶
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一株海藻糖合成酶产生菌的鉴定及产酶条件优化
18
作者 奚悦 高云 +1 位作者 卢小玲 刘小宇 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2014年第7期751-754,共4页
目的对一株海洋来源的产海藻糖合成酶菌株进行鉴定及产酶条件的初步优化。方法通过16SrDNA基因序列的同源性分析,对一株来源于东海海水的海藻糖合成酶产生菌进行鉴定,并通过单因素分析初步研究其培养特性和最佳的发酵条件。结果该菌16... 目的对一株海洋来源的产海藻糖合成酶菌株进行鉴定及产酶条件的初步优化。方法通过16SrDNA基因序列的同源性分析,对一株来源于东海海水的海藻糖合成酶产生菌进行鉴定,并通过单因素分析初步研究其培养特性和最佳的发酵条件。结果该菌16SrDNA序列与GenBank中已知序列相比,最高相似度为100%,鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas),命名为Pseudomonassp.A50。其最佳碳源和氮源分别为2%麦芽糖和0.5%酵母膏,最佳NaCl浓度为2.5%,在初始pH7.8,接种量1%,装液量125mL/250mL,28℃,130r/min发酵48h,海藻糖合成酶活力达到最高。结论此产海藻糖合成酶菌株为假单胞菌属,优化后,海藻糖合成酶活力达到14.16U/mL。 展开更多
关键词 海洋假单胞菌 海藻糖合成酶 发酵培养基优化
钠离子通道β4亚基糖基化的初步研究
19
作者 周婷婷 潘传涌 +1 位作者 张建鹏 金慧英 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期10-16,共7页
异常表达的糖蛋白与PD等多种神经退行性疾病有关。糖蛋白组学研究发现,电压门控钠离子通道β4亚基在PD病人脑组织中表达明显增加。为了深入探索β4亚基及其糖链在帕金森发生发展中的作用,采用PD转基因鼠对其表达进行验证,对其潜在的糖... 异常表达的糖蛋白与PD等多种神经退行性疾病有关。糖蛋白组学研究发现,电压门控钠离子通道β4亚基在PD病人脑组织中表达明显增加。为了深入探索β4亚基及其糖链在帕金森发生发展中的作用,采用PD转基因鼠对其表达进行验证,对其潜在的糖基化位点进行定点突变,构建重组表达质粒。结果发现,在新生PD转基因鼠和野生成鼠脑组织中有~38kDa蛋白条带表达,而在新生野生鼠脑组织中不表达;用PNGase F酶处理去除糖链后,~38kDa蛋白条带变成迁移速递更快的较小分子量条带,说明β4亚基是高度糖基化的蛋白,并且其糖基化与生长发育有关。将突变重组质粒转入HEK-293细胞和小鼠神经瘤细胞Neuro2A中表达,结果发现突变型质粒分子量明显低于野生型。为研究β4亚基及其糖链的功能提供了一定的实验数据并打下了基础。 展开更多
关键词 电压门控钠离子通道β4亚基 糖基化 帕金森病
医学生物技术综合性分子生物学实验课程设计 预览 被引量:7
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作者 高云 刘小宇 +4 位作者 孙铭娟 钟山 卢小玲 魏善建 焦炳华 《基础医学教育》 2014年第3期182-184,共3页
综合性实验课程在高校人才培养过程中的作用越来越突出,分子生物学实验作为医学生物技术专业的一门核心课程也要尝试综合性、设计性课程改革,对医学生物技术专业综合性分子生物学实验课程的教学课程设计环节中遇到的问题进行一些探索... 综合性实验课程在高校人才培养过程中的作用越来越突出,分子生物学实验作为医学生物技术专业的一门核心课程也要尝试综合性、设计性课程改革,对医学生物技术专业综合性分子生物学实验课程的教学课程设计环节中遇到的问题进行一些探索和思考。 展开更多
关键词 分子生物学 生物技术 综合性实验 教学研究
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