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碘普罗胺对HK-2细胞凋亡及对Klotho/Wnt/β-catenin信号通路的影响 预览
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作者 陈燕玲 罗婷 +7 位作者 高昕乐 许志威 凡栋 吴秀香 靳俊峰 王智 赵晓朵 庄晓东 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第5期729-733,共5页
目的造影剂肾病的发病机制迄今尚未完全阐明,文中旨在观察碘普罗胺对人肾近曲小管上皮细胞(HK-2)细胞凋亡以及Klotho/Wnt/β-catenin信号通路的影响,探讨碘普罗胺引起急性肾损伤的可能机制。方法用不同浓度的碘普罗胺(37、74、111、148 ... 目的造影剂肾病的发病机制迄今尚未完全阐明,文中旨在观察碘普罗胺对人肾近曲小管上皮细胞(HK-2)细胞凋亡以及Klotho/Wnt/β-catenin信号通路的影响,探讨碘普罗胺引起急性肾损伤的可能机制。方法用不同浓度的碘普罗胺(37、74、111、148 mgI/mL)处理HK-2细胞24 h,应用CCK-8法测定细胞活力,DAPI染色法观察细胞核凋亡形态,Western blot法测定凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved-caspase-3蛋白以及Klotho、Wnt、磷酸化-β-catenin(p-β-catenin)及β-catenin蛋白表达水平。另外,加入不同剂量的N-乙酰半胱氨酸(NAC)(2、4、8、16、32 mmol/L)处理,检测NAC对碘普罗胺诱导的HK-2细胞Klotho/Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响。结果与对照组相比,不同浓度的碘普罗胺处理组HK-2细胞活力明显降低(P <0.05);而细胞凋亡率明显增高(P <0.05);Cleaved-caspase-3、Wnt、p-β-catenin及β-catenin蛋白表达明显升高(P <0.05),而Klotho蛋白表达水平明显降低(P <0.05)。除了37mgI/mL碘普罗胺组外,其余碘普罗胺处理组Bax/Bcl-2比值均较对照组增高(P <0.05)。加入NAC处理后,能逆转碘普罗胺对Klotho/Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达的影响(P <0.05)。结论碘普罗胺可诱导HK-2细胞发生凋亡,其机制可能与其下调Klotho蛋白表达,激活Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 KLOTHO 凋亡 WNT Β-CATENIN 碘普罗胺
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丹酚酸B抑制碘普罗胺诱导的HK-2细胞凋亡的作用及机制
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作者 高昕乐 陈阳 +7 位作者 罗婷 赵晓朵 庄晓东 吴秀香 凡栋 陈燕玲 何柳桦 靳俊峰 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期2398-2404,共7页
目的研究丹酚酸B抑制碘普罗胺诱导的人肾近端小管上皮细胞HK-2凋亡的作用及机制。方法将HK-2细胞分为对照组、模型(碘普罗胺)组、丹酚酸B各浓度(1、10、50、100、200μmol/L)处理组及丹酚酸B(200μmol/L)对照组。采用CCK-8法检测丹酚酸... 目的研究丹酚酸B抑制碘普罗胺诱导的人肾近端小管上皮细胞HK-2凋亡的作用及机制。方法将HK-2细胞分为对照组、模型(碘普罗胺)组、丹酚酸B各浓度(1、10、50、100、200μmol/L)处理组及丹酚酸B(200μmol/L)对照组。采用CCK-8法检测丹酚酸B对碘普罗胺诱导的HK-2细胞增殖的影响,DAPI染色法观察细胞核形态的变化,DCFH-DA染色荧光显微镜观察结合流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)水平,Western blotting法检测细胞Bax、Bcl-2、cleaved Caspase-3、磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化的细胞外调节蛋白激酶(p-ERK1/2)及Klotho蛋白表达量。结果与对照组比较,模型组细胞活力显著降低(P<0.01),部分细胞核出现染色质浓缩及核分裂等凋亡特征,ROS水平及Bax、cleaved Caspase-3、p-ERK1/2蛋白表达水平显著增加(P<0.05、0.01),而Bcl-2、p-Akt及Klotho蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01);丹酚酸B 50、100、200μmol/L可以部分逆转碘普罗胺的上述效应。但低浓度的丹酚酸B(1、10μmol/L)对碘普罗胺诱导的HK-2细胞无明显保护作用。结论丹酚酸B可以抑制碘普罗胺诱导的HK-2细胞凋亡,其机制可能与抗氧化应激,激活Akt信号通路、抑制ERK信号通路及上调Klotho蛋白表达有关。 展开更多
关键词 丹酚酸B 碘普罗胺 KLOTHO 凋亡 蛋白激酶B 细胞外调节蛋白激酶
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