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2种猪冠状病毒双重RT-PCR检测方法的建立与应用 预览
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作者 温海京 贾超伟 +3 位作者 刘芊麟 张喜喜 刘鑫宇 周双海 《北京农学院学报》 2019年第1期51-55,共5页
【目的】建立一种可同时检测2种猪冠状病毒即猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的双重RT-PCR检测方法并进行临床应用。【方法】对TGEV和PEDV的单项RT-PCR方法分别进行条件优化后对2种病毒的双重RT-PCR进行条件优化并进... 【目的】建立一种可同时检测2种猪冠状病毒即猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的双重RT-PCR检测方法并进行临床应用。【方法】对TGEV和PEDV的单项RT-PCR方法分别进行条件优化后对2种病毒的双重RT-PCR进行条件优化并进行特异性与敏感性试验,然后用单项RT-PCR方法和双重RT-PCR对临床样品进行比较检测。【结果】双重RT-PCR检测方法的PEDV与TGEV的检测敏感度分别为59、49copies/μL,该方法对当前常见猪源RNA病毒的检测结果都为阴性。该方法对2013-2016年18个猪场的235份仔猪腹泻样品的检测结果显示,PEDV和TGEV的个体阳性率分别为73.6%和2.1%,与单项RTPCR方法检测结果无显著性(P>0.05)差异,临床样品中PEDV的猪场阳性率与个体阳性率都极显著(P<0.01)高于TGEV。【结论】建立了一种有较高灵敏性与特异性的PEDV与TGEV的双重RT-PCR检测方法,近年来猪传染性腹泻样品中PEDV检出率极显著高于TGEV。 展开更多
关键词 猪冠状病毒 猪传染性胃肠炎病毒 猪流行性腹泻病毒 双重RT-PCR
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3株猪流行性腹泻病毒M基因克隆与序列分析 预览 被引量:1
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作者 贾超伟 柳迦鹏 +3 位作者 张喜喜 刘芊麟 周双海 宋勤叶 《北京农学院学报》 2018年第3期53-56,共4页
【目的】了解近年来京津冀地区猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行株M基因的变异情况。【方法】用RT-PCR技术从京津冀地区部分仔猪腹泻样品中扩增与克隆3株PEDV流行株M基因全长序列,并进行序列测定和分析。【结果】基因序列结果显示,3株PEDV... 【目的】了解近年来京津冀地区猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行株M基因的变异情况。【方法】用RT-PCR技术从京津冀地区部分仔猪腹泻样品中扩增与克隆3株PEDV流行株M基因全长序列,并进行序列测定和分析。【结果】基因序列结果显示,3株PEDV的M基因全长均为681nt,其核苷酸同源性达99.7%以上,在系统发育进化方面属于同一簇。M基因系统发育进化关系显示,虽然这3株PEDV与中国以前PEDV流行毒株及疫苗株CV777属于不同的簇,但其与国内外其他PEDV参考毒株的核苷酸同源性均达96.5%以上。【结论】M基因仍然是检测PEDV的良好目的基因。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 M基因 基因克隆 序列分析
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卡那霉素单克隆抗体制备以及化学发光免疫检测试剂盒的研制 预览
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作者 万宇平 彭庆军 +3 位作者 于海浪 郑迎春 贾芳芳 冯月君 《中国酿造》 北大核心 2018年第4期111-114,共4页
通过卡那霉素与邻苯二甲酸酐反应,制备出卡那霉素半抗原,通过动物免疫、细胞融合,获得杂交瘤细胞株,再由杂交瘤细胞株分泌得到抗卡那霉素单克隆抗体,从而制备出能够检测牛奶和奶粉样本中卡那霉素药物的化学发光免疫检测试剂盒。试剂盒... 通过卡那霉素与邻苯二甲酸酐反应,制备出卡那霉素半抗原,通过动物免疫、细胞融合,获得杂交瘤细胞株,再由杂交瘤细胞株分泌得到抗卡那霉素单克隆抗体,从而制备出能够检测牛奶和奶粉样本中卡那霉素药物的化学发光免疫检测试剂盒。试剂盒对奶粉的检测限为0.95ug/kg,对牛奶的检测限为0.89ug/kg,对牛奶的回收率为80.6%~105.6%,批内、批间相对标准偏差范围均<10%。卡那霉素单克隆抗体与链霉素、双氢链霉素、新霉素的交叉反应率分别为7.1%、9.0%、4.6%。试剂盒至少能够在4丈保存1年。 展开更多
关键词 卡那霉素 单克隆抗体 化学发光 免疫检测试剂盒
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加强门头沟区村级动物防疫员队伍建设的建议
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作者 陶文雯 杨璐 赵旭 《当代畜牧》 2018年第5期77-78,共2页
笔者通过对门头沟区村级防疫员问卷调查结果进行分析,发现了当前村级防疫员队伍存在的问题,提出在今后加强防疫员队伍建设的几点建议。
关键词 动物防疫 村级防疫员 队伍建设
环境水样中地塞米松的酶联免疫法测定 预览 被引量:1
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作者 吴小胜 刘萤 +4 位作者 崔廷婷 何方洋 冯鑫 贾超伟 崔凤云 《山东畜牧兽医》 2018年第5期1-3,共3页
通过对地塞米松分子结构进行改造,制备了地塞米松半抗原及人工抗原,免疫动物得到了地塞米松的单克隆抗体,建立了地塞米松间接竞争酶联免疫检测方法。结果表明,Logit/Log拟合标准曲线方程为Y=-2.1426X–9884,相关指数R2为0.9965,半数抑... 通过对地塞米松分子结构进行改造,制备了地塞米松半抗原及人工抗原,免疫动物得到了地塞米松的单克隆抗体,建立了地塞米松间接竞争酶联免疫检测方法。结果表明,Logit/Log拟合标准曲线方程为Y=-2.1426X–9884,相关指数R2为0.9965,半数抑制浓度(IC50)为0.337μg/L,环境水样的检测限为0.5μg/L,地塞米松阳性样本的加标回收率为75%~105%,样本重复检测结果的变异系数<15%。建立的酶联免疫吸附方法具有较好的特异性、回收率和重复稳定性,可用于环境水样中地塞米松残留的检测。 展开更多
关键词 地塞米松 酶联免疫检测 环境水样
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鸡新城疫不同免疫方法对散养蛋鸡免疫效果的影响
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作者 于海浪 《当代畜牧》 2016年第7期57-59,共3页
目前,北京市门头沟区广大养鸡户对鸡新城疫免疫方法主要有滴鼻点眼和饮水免疫2种。为了探索最佳的免疫方法,笔者从某鸡场挑选同批次雏鸡120羽,将其分为4组,用鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗(La Sota株+H120株)分别采用滴鼻点眼... 目前,北京市门头沟区广大养鸡户对鸡新城疫免疫方法主要有滴鼻点眼和饮水免疫2种。为了探索最佳的免疫方法,笔者从某鸡场挑选同批次雏鸡120羽,将其分为4组,用鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗(La Sota株+H120株)分别采用滴鼻点眼、1倍量饮水免疫、2倍量饮水免疫、4倍量饮水免疫这4种免疫方法进行免疫接种,并于免疫前第0天,免疫后第7天、第14天、第21天、第28天、第35天、第42天,针对母源抗体和免疫效果进行抗体检测。结果表明,试验中采用的不同免疫方法均能对试验鸡群产生一定的免疫效果,其中滴鼻点眼免疫组抗体效价可达7.6log_2,免疫后第42天时降至6.4log_2;1倍量饮水免疫组抗体效价可达4.8log_2,免疫后第42天时降至3.2log_2;2倍量饮水免疫组抗体效价可达7.2log_2,免疫后第42天时降至5.2log_2;4倍量饮水免疫组抗体效价可达6.4log_2,免疫后第42天时降至4.4log_2。该试验说明,滴鼻点眼法所产生的抗体水平明显高于其他免疫法;因此,相比较之下,滴鼻点眼法为最佳。但考虑到工作量和可操作性等实际因素,当鸡群养殖量较大时,2倍量饮水免疫法为最佳。 展开更多
关键词 鸡新城疫 免疫方法 效果
北京市门头沟区鸡主要寄生虫调查与分析
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作者 于海浪 任晓明 《当代畜牧》 2014年第8期46-47,共2页
为了解和掌握门头沟区鸡主要寄生虫的种类和流行情况,笔者从门头沟区7个乡镇随机抽取350羽鸡开展调查。经取样、临床观察、剖检和实验室鉴别诊断,共发现鸡寄生虫12种,分别隶属于10科10属。确定优势虫种为鸡羽虱,感染率44.3%;鸡皮刺螨,... 为了解和掌握门头沟区鸡主要寄生虫的种类和流行情况,笔者从门头沟区7个乡镇随机抽取350羽鸡开展调查。经取样、临床观察、剖检和实验室鉴别诊断,共发现鸡寄生虫12种,分别隶属于10科10属。确定优势虫种为鸡羽虱,感染率44.3%;鸡皮刺螨,感染率42.3%;鸡圆羽虱,感染率25.1%;柔嫩艾美耳球虫,感染率18.9%;鸡奇棒恙螨,感染率16.0%;鸡蛔虫,感染率14.9%;四角赖利绦虫,感染率11.4%;异刺线虫,感染率11.1%;毒害艾美耳球虫,感染率9.1%。针对本次的调查数据,结合门头沟区动物养殖及疫病防控实际情况进行讨论和分析,提出掌握鸡寄生虫病相关知识,重视其所造成的危害,同时改善养殖环境,做好环境消毒,定期驱虫,由区动物疫控部门做宣传培训工作,并加强镇、村两级动物防疫队伍专业技术力量等关于鸡寄生虫病防治的合理建议,也为开展该区鸡寄生虫病具体防控工作提供了科学依据。 展开更多
关键词 门头沟区 鸡寄生虫 调查 分析
浅析新城疫的综合防治 预览
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作者 杨璐 赵旭 《兽医导刊》 2018年第12期15-15,共1页
鸡新城疫在世界上目前还是十分流行的,它是因新城疫病毒感染禽类而导致其出现急性、热性、高度传染性以及出血败血性的一种禽类传染疾病。该病病势凶猛、蔓延迅速、发病率和死亡率高,其主要临床症状表现为体温升高、呼吸障碍、腹泻、... 鸡新城疫在世界上目前还是十分流行的,它是因新城疫病毒感染禽类而导致其出现急性、热性、高度传染性以及出血败血性的一种禽类传染疾病。该病病势凶猛、蔓延迅速、发病率和死亡率高,其主要临床症状表现为体温升高、呼吸障碍、腹泻、神经性症状、部分粘膜以及浆膜偶发出血点等。具有很高的发病率和病死率,是危害养禽业的一种主要传染病。为了进一步了解和认识鸡新城疫,本文就鸡新城疫的治疗与预防进行了探讨。 展开更多
关键词 鸡新城疫 治疗 预防 控制
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猪细小病毒病防制措施的探讨 预览
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作者 赵旭 杨璐 《兽医导刊》 2018年第12期104-104,共1页
猪细小病毒病的发生对怀孕造成严重影响,引起怀孕母猪发生流产、死胎和木乃伊胎,严重时造成久配不孕,从而淘汰,给生猪养殖发展造成了严重的损失,因此对于该病的防治对于种场和规模场来说意义重大,本文对猪细小病毒病的预防和控制... 猪细小病毒病的发生对怀孕造成严重影响,引起怀孕母猪发生流产、死胎和木乃伊胎,严重时造成久配不孕,从而淘汰,给生猪养殖发展造成了严重的损失,因此对于该病的防治对于种场和规模场来说意义重大,本文对猪细小病毒病的预防和控制作了详细分析和探讨,试图为临床防治和净化本病提供参考。 展开更多
关键词 猪细小病毒病 防制
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