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马齿苋多糖对高糖诱导的人晶状体上皮细胞发生上皮间质转化的影响 认领
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作者 刘珺 胡雨彤 +2 位作者 刘江涛 仝警安 周海燕 《现代中医药》 CAS 2021年第1期15-19,41,共6页
目的观察马齿苋多糖对高糖作用下永生系人晶状体上皮细胞(SRA01/04)上皮间质转化的影响。方法体外培养SRA01/04细胞,将传代的细胞随机分为正常对照组、高糖组、高糖+马齿苋多糖组,分别用含5.5mmol/L葡萄糖、30mmol/L葡萄糖、30mmol/L葡... 目的观察马齿苋多糖对高糖作用下永生系人晶状体上皮细胞(SRA01/04)上皮间质转化的影响。方法体外培养SRA01/04细胞,将传代的细胞随机分为正常对照组、高糖组、高糖+马齿苋多糖组,分别用含5.5mmol/L葡萄糖、30mmol/L葡萄糖、30mmol/L葡萄糖+0.5mg/mL马齿苋多糖的培养基培养48h,于培养的0h、6h、12h、24h、48h在倒置显微镜下分别观察三组的细胞形态学变化;48h后Western-blot检测细胞ZO-1、E-cadherin及α-SMA、Vimentin的蛋白表达变化。结果与对照组相比,高糖组细胞随时间延长细胞变长出现成纤维改变,细胞数量也逐渐减少;高糖联合马齿苋多糖组与正常组的形态变化基本趋于一致,没有随着时间延长而发生明显的梭形改变。与对照组相比,高糖组ZO-1、E-cadherin表达下降(P<0.01),α-SMA和Vimentin的表达上升(P<0.01);高糖联合马齿苋多糖组ZO-1、E-cadherin表达下降(P<0.05),α-SMA和Vimentin的表达上升(P<0.05)。与高糖组相比,高糖联合马齿苋多糖组ZO-1、E-cadherin表达上升(P<0.01),α-SMA和Vimentin的表达下降(P<0.01)。结论高糖可以诱导晶状体上皮细胞发生上皮间质转化,马齿苋多糖可以抑制这一过程。 展开更多
关键词 马齿苋多糖 人晶状体上皮细胞 高糖 上皮间质转化
文章速递TGF-β1对SKOV-3细胞EMT的影响及相关分子机制研究 认领
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作者 闫晓楠 杜辉 +3 位作者 左宏玲 张娜 王惠兰 徐春琳 《河北医药》 CAS 2021年第6期833-836,841,共5页
目的研究TGF-β1(TGF-β1)对上皮性卵巢癌SKOV-3细胞上皮间质转化(EMT)的影响及相关分子机制。方法MTT法检测各浓度TGF-β1(1、2、5以及10 ng/ml)干预24、48 h后,SKOV-3细胞增殖所受影响(对照组TGF-β10 ng/ml);Transwell检测培养48 h后... 目的研究TGF-β1(TGF-β1)对上皮性卵巢癌SKOV-3细胞上皮间质转化(EMT)的影响及相关分子机制。方法MTT法检测各浓度TGF-β1(1、2、5以及10 ng/ml)干预24、48 h后,SKOV-3细胞增殖所受影响(对照组TGF-β10 ng/ml);Transwell检测培养48 h后SKOV-3细胞的侵袭能力,实验分组:TGF-β1组(浓度1、2、5、10 ng/ml)、LY294002组(PI3K抑制剂,浓度10μmol/ml)、LY294002+TGF-β1组(浓度10μmol/ml+10 ng/ml)、对照组(PBS);蛋白印迹(Western blot)法检测培养48 h后各组丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶B(Serine-threonine protein kinase B,p-Akt)、转录因子Twist(Transcriptional factor Twist,Twist)、神经钙黏(Nerual-cadherin,N-cadherin)蛋白及上皮钙黏(Epithelial-cadherin,E-cadherin)蛋白等的表达情况,分组如下:TGF-β1组(浓度10 ng/ml)、LY294002组(浓度10μmol/ml)、LY294002+TGF-β1组(浓度10μmol/ml+10 ng/ml)、对照组(RPMI-1640)。结果MTT:TGF-β1对SKOV-3细胞无明显促增殖作用(P>0.05);Transwell:不同浓度TGF-β1干预后SKOV-3穿过小室细胞数目多于对照组,呈浓度依赖性(P<0.05);LY294002单独或联合TGF-β1组,SKOV-3细胞运动侵袭能力均显著降低(P<0.05);Western blot:经TGF-β1干预后p-Akt、Twist、N-cadherin蛋白表达水平显著增加,E-cadherin蛋白表达水平显著降低;LY294002单独或联合TGF-β1可逆转上述蛋白的表达情况(P<0.05)。结论TGF-β1可对PI3K/Akt信号通路起激活作用,从而诱导SKOV-3细胞出现EMT,促使其侵袭转移能力增强。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 上皮间质转化 TGF-β1 细胞增殖 侵袭转移
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抑癌基因PDCD4的表达对南蛇藤提取物抑制人胃癌裸鼠移植瘤生长的影响 认领
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作者 巴赫 彭强 朱耀东 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第3期358-362,共5页
目的探讨抑癌基因程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的表达变化在南蛇藤提取物(COE)抑制人胃癌裸鼠皮下移植瘤生长中的作用。方法将外源性重组真核质粒pcDNA3.1-PDCD4转染到人胃癌细胞SGC-7901内,经G418筛选并建立高表达PDCD4的稳定转染细胞... 目的探讨抑癌基因程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的表达变化在南蛇藤提取物(COE)抑制人胃癌裸鼠皮下移植瘤生长中的作用。方法将外源性重组真核质粒pcDNA3.1-PDCD4转染到人胃癌细胞SGC-7901内,经G418筛选并建立高表达PDCD4的稳定转染细胞。同时建立胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为对照组、pcDNA3.1组、pcDNA3.1-PDCD4组、COE组、pcDNA3.1+COE组、pcDNA3.1-PDCD4+COE组。观察各组移植瘤生长状况、免疫组织化学法检测移植瘤组织内PDCD4、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达情况。结果pcDNA3.1-PDCD4组、COE组、pcDNA3.1+COE组、pcDNA3.1-PDCD4+COE组与对照组相比,均可抑制肿瘤的生长(P<0.05),抑瘤率分别为59.29%、57.52%、58.41%、71.68%;均可上调PDCD4、Ecadherin蛋白的表达,下调N-cdherin、Vimentin蛋白的表达(P<0.05)。pcDNA3.1-PDCD4+COE组与其余3组相比,抑瘤率更高(P<0.05),PDCD4、E-cadherin、N-cdherin、Vimentin蛋白表达水平的变化更大(P<0.05)。结论抑癌基因PDCD4可能参与COE对胃癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,其机制可能与影响上皮间质转化(EMT)过程有关。 展开更多
关键词 南蛇藤 胃癌 程序性细胞死亡因子4 上皮间质转化
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miR-138在肝细胞癌中的表达及其对MHCC97H细胞侵袭、迁移能力的影响 认领
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作者 曾保征 王赣 +2 位作者 陈超 黄远丽 董超 《山东医药》 CAS 2021年第1期40-43,共4页
目的观察miR-138在肝细胞癌(HCC)组织、细胞中的表达变化,并探讨miR-138对MHCC97H细胞侵袭、迁移能力及上皮间质转化(EMT)的影响。方法采用qRT-PCR检测HCC组织及癌旁组织、MHCC97H、MHCC97L、HepG2及正常肝细胞系L02细胞中的miR-138。转... 目的观察miR-138在肝细胞癌(HCC)组织、细胞中的表达变化,并探讨miR-138对MHCC97H细胞侵袭、迁移能力及上皮间质转化(EMT)的影响。方法采用qRT-PCR检测HCC组织及癌旁组织、MHCC97H、MHCC97L、HepG2及正常肝细胞系L02细胞中的miR-138。转染miR-138 mimics及NC-mimics至MHCC97H细胞,分别通过划痕实验、Transwell侵袭实验及Western blotting法观察上调miR-138对MHCC97H细胞侵袭、迁移能力及E-cadherin、Vimentin蛋白等EMT相关蛋白表达的影响。结果与癌旁组织比较,miR-138在HCC组织中的表达下降(P<0.05)。HCC组织中miR-138表达与患者微血管侵犯、TNM分期有关(P均<0.05)。与L02细胞比较,miR-138在MHCC97H、MHCC97L、HepG2细胞中的表达均下降(P均<0.05),且miR-138在MHCC97H细胞中的表达低于MHCC97L细胞和HepG2细胞(P均<0.05)。上调miR-138表达后,MHCC97H细胞侵袭和迁移能力下降(P均<0.05),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),Vimentin蛋白表达下降(P<0.05)。结论miR-138在HCC中表达降低,上调miR-138能抑制HCC细胞的侵袭迁移能力及EMT。 展开更多
关键词 肝细胞癌 miR-138 侵袭 迁移 上皮间质转化
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姜黄素对食管癌细胞中上皮间质转化标志基因表达的影响及Notch、Wnt通路的调节作用 认领
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作者 李佳 杨晓丹 刘永叶 《中国药物经济学》 2021年第2期104-107,共4页
目的探讨姜黄素对食管癌细胞中上皮间质转化(EMT)标志基因表达的影响及Notch、Wnt通路的调节作用。方法选择食管癌Eca-109细胞株进行培养并分为空白对照组及不同剂量姜黄素组(20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L),处理24 h后... 目的探讨姜黄素对食管癌细胞中上皮间质转化(EMT)标志基因表达的影响及Notch、Wnt通路的调节作用。方法选择食管癌Eca-109细胞株进行培养并分为空白对照组及不同剂量姜黄素组(20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L),处理24 h后测定细胞中EMT标志基因、Notch通路基因、Wnt通路基因的表达量。结果不同剂量姜黄素组的细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)的m RNA表达量明显高于空白对照组(P<0.05),N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、Notch1、Jagged1、发状分裂相关增强子(HES)、Wnt1、β-连环蛋白(β-catenin)的mRNA表达量明显低于空白对照组(P<0.05);其中160μmol/L姜黄素组细胞中E-cadherin、GSK-3β的m RNA表达量分别为2.05±0.42、2.85±0.48明显高于其他各组(P<0.05),N-cadherin、Vimentin、Notch1、Jagged1、Hes、Wnt1、β-catenin的mRNA表达量分别为0.45±0.08、0.39±0.06、0.39±0.05、0.44±0.07、0.52±0.06、0.41±0.07、0.29±0.05明显低于其他各组(P<0.05)。结论姜黄素能够通过抑制Notch通路、Wnt通路来阻碍食管癌细胞中的EMT过程。 展开更多
关键词 食管癌 姜黄素 上皮间质转化 NOTCH通路 WNT通路
优降宁与多柔比星协同抑制小鼠三阴性乳腺癌4T-1细胞的增殖和迁移 认领
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作者 任雪 王世恩 +5 位作者 汪湘 陈倩影 张浩 谈恒星 夏燕 曹春雨 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期571-578,共8页
目的研究赖氨酸特异性去甲基化酶1(lysine-specifc demethylase 1,LSD1)抑制剂优降宁(Pargyline)与化疗药物多柔比星(Doxorubicin)联合应用对小鼠三阴性乳腺癌4T-1细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法体外实验以小鼠三阴性乳腺癌4T-1细胞... 目的研究赖氨酸特异性去甲基化酶1(lysine-specifc demethylase 1,LSD1)抑制剂优降宁(Pargyline)与化疗药物多柔比星(Doxorubicin)联合应用对小鼠三阴性乳腺癌4T-1细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法体外实验以小鼠三阴性乳腺癌4T-1细胞为模型,以CCK-8法、乳酸脱氢酶释放实验、Chou-Talay法、划痕实验、Transwell实验、Western blot等试验方法检测两药联合对4T-1细胞增殖、侵袭、迁移的影响;构建荷瘤小鼠模型研究两药联用对4T-1细胞体内增殖的影响。结果优降宁和多柔比星可有效抑制4T-1细胞增殖、迁移和侵袭,两药联用具有协同效应,且无明显细胞毒性。体内实验证明,与单用药组相比,两药联用可明显抑制乳腺癌的体内增殖并延长三阴性乳腺癌4T-1细胞荷瘤小鼠的生存期。结论优降宁与多柔比星联合应用对小鼠乳腺癌4T-1细胞的增殖、迁移和侵袭具有协同抑制效应,具有用于临床三阴性乳腺癌治疗的潜在价值。 展开更多
关键词 优降宁 多柔比星 联合用药 三阴性乳腺癌 4T-1细胞 上皮间质转化
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低氧诱导因子-1α在子宫内膜异位症患者血清中的表达和对在位子宫内膜间质细胞上皮-间质转化的影响 认领
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作者 薛源 林雪艳 +1 位作者 徐歌 田永杰 《山东大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2021年第2期41-47,共7页
目的研究低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在子宫内膜异位症(EMS)患者血清中的表达水平及诊断价值,探讨HIF-1α对EMS在位子宫内膜间质细胞上皮-间质转化(EMT)的影响。方法采用ELISA法对EMS(36例,EMS组)和子宫肌瘤(43例,对照组)患... 目的研究低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在子宫内膜异位症(EMS)患者血清中的表达水平及诊断价值,探讨HIF-1α对EMS在位子宫内膜间质细胞上皮-间质转化(EMT)的影响。方法采用ELISA法对EMS(36例,EMS组)和子宫肌瘤(43例,对照组)患者血清的HIF-1α水平进行测量分析,其中EMS组患者临床分期I期、Ⅱ期为EMS轻度组,Ⅲ期、Ⅳ期为EMS重度组。采用受试者工作特征(ROC)曲线以及曲线下面积(AUC)反应HIF-1α的诊断水平。取EMS在位子宫内膜分离培养提取原代间质细胞,干扰HIF-1α表达的慢病毒和空白病毒分别转染该细胞,得到sh-HIF-1α和sh-NC两组细胞,采用Western blotting法测量EMT相关分子(N-Cadherin、vimentin、Slug)的表达;Transwell法对比两组细胞的迁移、侵袭能力;流式细胞术检测两组细胞的凋亡率。结果EMS组与对照组比较,其血清HIF-1α表达水平明显增高(P<0.001);其ROC曲线及AUC结果显示HIF-1α对EMS具有一定的诊断效力,子宫内膜增生期与分泌期所对应的血清HIF-1α表达差异无统计学意义(P=0.593),EMS重度组患者血清HIF-1α含量显著高于EMS轻度组(P<0.001)。sh-HIF-1α组细胞的N-Cadherin(P=0.013)、vimentin(P=0.045)、Slug(P=0.038)表达均降低,细胞迁移、侵袭力减弱(P均<0.001),凋亡率升高(P=0.013)。结论HIF-1α在EMS患者血清中表达水平明显升高,可作为一项潜在的临床诊断指标;HIF-1α可能通过调控EMT过程影响EMS的发生发展。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 低氧诱导因子-1Α 上皮-间质转化 迁移、侵袭 细胞凋亡
胃癌患者术后血清中TGFBI与复发转移的关系及其机制 认领
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作者 肖萍 宋振宇 姚倩 《现代消化及介入诊疗》 2021年第1期72-76,共5页
目的探讨术后血清细胞外基质蛋白转化生长因子β诱导(TGFBI)对胃癌复发转移的影响及其作用机制。方法利用shRNA结合慢病毒技术稳定敲低胃癌细胞SGC-7901中TGFBI的表达,并通过Western blot对其在细胞内及培养上清中的表达进行验证;MTT法... 目的探讨术后血清细胞外基质蛋白转化生长因子β诱导(TGFBI)对胃癌复发转移的影响及其作用机制。方法利用shRNA结合慢病毒技术稳定敲低胃癌细胞SGC-7901中TGFBI的表达,并通过Western blot对其在细胞内及培养上清中的表达进行验证;MTT法检测TGFBI下调对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响,Transwell法检测其对细胞侵袭与迁移的影响;通过检测E-cadherin、Snail和ZEB1等转录因子的表达,探究TGFBI是否通过上皮间质转化促进胃癌的转移复发。结果胃癌患者血清样本中TGFBI表达水平显著高于正常样本,RNA干扰后TGFBI在胃癌细胞SGC-7901内及其培养上清中的表达水平均发生显著下降;TGFBI下调后胃癌细胞SGC-7901的增殖、侵袭与迁移能力均受到显著抑制,同时上皮间质转化标志物E-cadherin的表达发生上调,而Snail和ZEB1的表达发生下调。结论胃癌细胞SGC-7901中TGFBI表达下调时可能通过抑制上皮间质转化,抑制胃癌细胞增殖、侵袭与迁移,最终抑制胃癌的转移复发。 展开更多
关键词 胃癌 TGFBI 细胞增殖 侵袭与迁移 上皮间质转化
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SOX2通过PI3K/AKT通路调控口腔鳞癌细胞迁徙的机制研究 认领
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作者 陈昌盛 吴煜农 +2 位作者 王琪 汪长林 史振怡 《临床口腔医学杂志》 2021年第2期67-71,共5页
目的:研究过表达SOX2通过PI3K/AKT通路促进口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞迁移及上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的作用及机制。方法:收集OSCC组织及正常口腔黏膜组织,培养OSCC细胞株Tca83、SC... 目的:研究过表达SOX2通过PI3K/AKT通路促进口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞迁移及上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的作用及机制。方法:收集OSCC组织及正常口腔黏膜组织,培养OSCC细胞株Tca83、SCC25、HN4与正常口腔上皮细胞株FM,检测SOX2的mRNA表达水平。Tca83细胞随机分为转染阴性对照(NC)质粒的NC组、转染SOX2质粒的SOX2组、转染NC质粒并加用安慰剂的安慰剂+NC质粒组、转染SOX2质粒并加用安慰剂的安慰剂+SOX2质粒组、转染SOX2质粒并加用PI3K抑制剂LY294002的LY294002+SOX2组,检测细胞迁移、EMT标志基因波形蛋白(Vimentin)及E-钙黏蛋白(E-cadherin)、p-PI3K、p-AKT的表达量。结果:OSCC组织中SOX2的mRNA表达水平高于正常口腔黏膜组织,Tca83、SCC25、HN4细胞中SOX2的mRNA表达水平高于FM细胞且Tca83细胞中SOX2表达增加幅度最弱。与NC组比较,SOX2组Tca83细胞的迁移增强,Vimentin、p-PI3K、p-AKT的表达增加,E-cadherin的表达减少。与安慰剂+SOX2组比较,LY294002+SOX2组Tca83细胞的迁移减弱,Vimentin、p-PI3K、p-AKT的表达减少,E-cadherin的表达增加。结论:OSCC中SOX2表达增加,过表达通过激活PI3K/AKT通路促进OSCC细胞迁移及EMT。 展开更多
关键词 口腔鳞癌 SOX2 迁移 上皮间质转化 PI3K/AKT通路
Six同源盒蛋白4蛋白在肝癌组织的表达及其对肝癌细胞恶性细胞生物学行为的影响 认领
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作者 周艳彩 周兵 +3 位作者 魏晓霞 吴虹杰 孙立华 朱斌 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2021年第2期277-280,共4页
目的探讨Six同源盒蛋白4(Six homeobox 4,Six4)蛋白在肝癌中表达及对肝癌细胞增殖、迁移和上皮-间充质转化的影响。方法选取2018年6月到2019年6月新乡医学院第一附属医院收集的169例肝癌组织和对应的癌旁组织作为研究对象,采用免疫组织... 目的探讨Six同源盒蛋白4(Six homeobox 4,Six4)蛋白在肝癌中表达及对肝癌细胞增殖、迁移和上皮-间充质转化的影响。方法选取2018年6月到2019年6月新乡医学院第一附属医院收集的169例肝癌组织和对应的癌旁组织作为研究对象,采用免疫组织化学分析肝癌组织和癌旁组织中Six4蛋白表达水平;采用常间回文重复序列丛集-Cas9(CRISPR-Cas9)在人类肝癌细胞HepG2中建立Six4敲除细胞系,命名为对照组和SIX4 KO组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色分析两组细胞增殖;采用Transwell分析两组细胞迁移;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析上皮间质标志物上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达水平,计量数据比较采用t检验。结果肝癌组织中Six4蛋白表达水平(169.59±18.59)高于癌旁组织(79.43±10.43),差异有统计学意义(t=4.179,P<0.05)。本研究成功构建Six4敲除细胞系。Six4 KO组细胞吸光值(1.21±0.19)低于对照组(2.15±0.28),差异有统计学意义(t=3.441,P<0.05)。对照组细胞EdU染色阳性率(76.45±8.90)%明显高于Six4 KO组细胞(31.63±7.43)%,差异有统计学意义(t=4.693,P<0.05)。Six4 KO组细胞迁移数量(65.64±9.99)个低于对照组(119.48±12.08)个,差异有统计学意义(t=3.748,P<0.05)。Six4 KO组细胞E-cadherin相对表达水平(1.49±0.21)高于对照组(0.33±0.11),差异有统计学意义(t=5.184,P<0.05)。Six4 KO组细胞间质标记物N-cadherin和Vimentin相对表达水平(0.58±0.11、0.68±0.23)低于对照组(1.74±0.28、1.89±0.26),差异均有统计学意义(t=4.274、4.109,P<0.05)。结论SIX4蛋白在肝癌组织中呈高表达,参与肝癌细胞增殖、迁移和上皮-间充质转化等恶性细胞生物学行为。 展开更多
关键词 Six同源盒蛋白4 肝癌 增殖 迁移 上皮-间充质转化
COL11A1在消化系统肿瘤中的研究进展 认领
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作者 刘雪影 许良璧 +1 位作者 李大欢 王景林 《中华胃肠内镜电子杂志》 2021年第1期42-45,共4页
胶原蛋白XI(collagen type XI,COL11)是一种次要胶原,其主要生理功能是调节主要胶原纤维的直径。COL11A1编码前胶原XI A1和成熟胶原XI A1的α1链,通常存在于软骨中,它在肌肉骨骼性疾病中的致病作用已被证实。但作为肿瘤微环境的重要成... 胶原蛋白XI(collagen type XI,COL11)是一种次要胶原,其主要生理功能是调节主要胶原纤维的直径。COL11A1编码前胶原XI A1和成熟胶原XI A1的α1链,通常存在于软骨中,它在肌肉骨骼性疾病中的致病作用已被证实。但作为肿瘤微环境的重要成分之一,COL11A1近年来引发越来越多的关注。研究表明,COL11A1可由癌相关成纤维细胞(CAFs)产生,可促进肿瘤上皮间质转化(EMT),是多种癌症发生、发展的重要因素,与肿瘤侵袭、转移、耐药等有关。本文将着重阐述COL11A1在常见消化系统肿瘤恶性进展中的作用及机制,以期对消化道肿瘤的治疗及后续研究方面提供有价值的参考。 展开更多
关键词 消化系统肿瘤 胶原蛋白XI A1 癌相关成纤维细胞 上皮间充质转化
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文章速递长链非编码RNA MEG3对乳腺癌细胞侵袭及迁移的影响 认领
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作者 许睿 钱军 +3 位作者 张明亮 张立功 郭晨旭 谢强 《赣南医学院学报》 2021年第3期256-260,共5页
目的:研究长链非编码RNA(Long non-coding RNA,LncRNA)MEG3对乳腺癌细胞侵袭及迁移的影响并探究其机制。方法:通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测乳腺癌细胞MDA-MB-231、MCF-7、SKBR-3中LncRNA MEG3表达,选取表达水平较低的MCF-7细胞株,... 目的:研究长链非编码RNA(Long non-coding RNA,LncRNA)MEG3对乳腺癌细胞侵袭及迁移的影响并探究其机制。方法:通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测乳腺癌细胞MDA-MB-231、MCF-7、SKBR-3中LncRNA MEG3表达,选取表达水平较低的MCF-7细胞株,构建pcDNA3.1-MEG3重组质粒,过表达MCF-7中的LncRNA MEG3,再通过qRT-PCR检查细胞miRNA-21变化情况。其次,通过划痕实验检测MCF-7细胞迁移变化;Transwell实验检测MCF-7细胞侵袭变化;Western blot检测上皮间质转化(EMT)相关分子(E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin)的表达量变化。结果:在MEG3过表达的MCF-7细胞株中,miRNA-21表达量降低,且细胞的侵袭及迁移能力也下降,细胞中的E-Cadherin蛋白表达量增高,而N-Cadherin及Vimentin表达量降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:LncRNA MEG3通过调控miRNA-21影响乳腺癌细胞侵袭及迁移能力,这种改变可能与E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin的表达逆转EMT进程有一定相关性。 展开更多
关键词 乳腺癌 长链非编码RNA MEG3 miRNA-21 上皮间质转化
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文章速递黄芩素对皮肤鳞状细胞癌增殖、迁移和上皮-间充质转化的影响 认领
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作者 王艳云 李存涛 +1 位作者 张永红 高明敏 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期526-528,共3页
目的探讨黄芩素对皮肤鳞状细胞癌增殖、迁移和上皮-间充质转化的影响及其机制。方法2018年6月到2019年6月,将皮肤鳞状细胞癌细胞系A431分为4组,分别采用0、10、50、100μmol/L黄芩素处理0、24、36和48 h采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析... 目的探讨黄芩素对皮肤鳞状细胞癌增殖、迁移和上皮-间充质转化的影响及其机制。方法2018年6月到2019年6月,将皮肤鳞状细胞癌细胞系A431分为4组,分别采用0、10、50、100μmol/L黄芩素处理0、24、36和48 h采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析细胞增殖;采用划痕实验分析细胞迁移;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析不同处理组细胞细胞核增殖抗原(Ki-67)、黏着斑激酶(FAK)和上皮-间充质转化标记蛋白标志蛋白波形蛋白(Vimentin)和上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)的表达水平。结果0、10、50和100μmol/L黄芩素组细胞采用黄芩素处理48 h后吸光度(A)值分别为2.47±0.21、2.07±0.17、1.71±0.20和1.30±0.12。4组细胞处理48 h后A值比较,差异有统计学意义(F=8.019,P<0.05)。0、10、50和100μmol/L黄芩素组细胞划痕愈合率分别为(85.21±7.09)%、(72.19±6.25)%、(43.19±5.10)%和(25.10±3.81)%。4组细胞划痕愈合率比较,差异有统计学意义(F=5.099,P<0.05)。0、10、50和100μmol/L黄芩素组细胞Ki-67相对表达水平分别为0.84±0.14、0.71±0.10、0.53±0.10和0.30±0.09。0、10、50和100μmol/L黄芩素组细胞FAK蛋白表达水平分别为1.04±0.11、0.82±0.12、0.64±0.09和0.29±0.09。4组细胞Ki-67和FAK蛋白表达水平比较,差异有统计学意义(F=4.710,P<0.05;F=4.928,P<0.05)。0、10、50和100μmol/L黄芩素组细胞间质标记蛋白Vimentin表达水平分别为1.28±0.15、0.97±0.13、0.64±0.12和0.33±0.10。0、10、50和100μmol/L黄芩素组细胞上皮标志蛋白E-cadherin表达水平分别为0.83±0.09、1.32±0.14、1.89±0.23和2.17±0.16。4组细胞Vimentin和E-cadherin表达水平比较,差异有统计学意义(F=3.091,P<0.05;F=3.951,P<0.05)。结论黄芩素可显著抑制皮肤鳞状细胞癌细胞增殖,迁移和上皮-间充质转化。 展开更多
关键词 黄芩素 皮肤鳞状细胞癌 增殖 迁移 上皮-间充质转化
文章速递A549细胞上皮-间质转分化中差异表达基因的生物信息学分析 认领
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作者 杨果 李超 +3 位作者 姚武 夏佳蕊 祁远梦 郝长付 《环境与职业医学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期245-253,共9页
[背景]在肺纤维化中,上皮-间质转分化(EMT)具有重要的作用。肺泡上皮细胞的EMT是肌成纤维细胞的一个重要来源。而随着高通量测序技术的发展,利用生物信息学的分析筛选EMT过程中的关键基因(Hub基因)引起了学者们的关注。[目的]分析人肺... [背景]在肺纤维化中,上皮-间质转分化(EMT)具有重要的作用。肺泡上皮细胞的EMT是肌成纤维细胞的一个重要来源。而随着高通量测序技术的发展,利用生物信息学的分析筛选EMT过程中的关键基因(Hub基因)引起了学者们的关注。[目的]分析人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549细胞)相关EMT过程中的差异表达基因,以此筛选肺纤维化相关EMT过程中的Hub基因以及相关的关键信号通路,以期为肺纤维化相关的EMT研究提供新的思路。[方法]从美国国立信息中心的基因表达综合数据库下载芯片数据集GSE17708,运用R语言中的limma包进行差异表达基因的分析。采用DAVID 6.8对差异表达基因进行基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路分析,并运用相互作用基因库检索工具数据库和Cytoscape软件绘制蛋白质-蛋白质相互作用网络。利用Cytoscape软件中的CytoHubba插件筛选Hub基因,最后通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)技术对A549细胞相关EMT过程中的Hub基因进行验证。[结果]基于高通量测序芯片的筛选,55个差异表达的基因主要参与的生物学途径包括胶原蛋白分解代谢的过程、细胞迁移正调控、生长负调节、内皮细胞凋亡过程的负调控以及细胞外基质组织;细胞组分的富集结果显示55个差异表达基因集中在胞外区和细胞外间隙;分子功能的富集显示差异表达基因主要具有细胞外基质结构组成、肝素结合、磷脂酰丝氨酸绑定、酶抑制剂的活动、纤连蛋白结合等功能。KEGG结果表明,差异表达基因可能参与细胞外基质受体相互作用、阿米巴类感染、黏着斑的形成、PI3K-Akt信号通路、矿物质吸收、血小板激活、补体及凝血级联反应、小细胞肺癌等信号通路。随后,通过最大团性中心方法筛选出得分最高的前8个基因(THBS1、COL4A1、COL5A1、COL4A2、FGG、SERPINE1、LAMC2、IGFBP5)作为EMT相关的Hub基因,qRT-PCR结果显示IGFBP5在A549细胞中的表达丰度较低,并且与对照组相比,TGF-β刺激A549细胞24 h和72 h的差异并不明显。除FGG在TGF-β刺激A549细胞24 h的时候表达情况与筛选结果不一致外,其他6个Hub基因表达情况与筛选结果一致。[结论]筛选出了7个与肺泡上皮细胞间质转分化相关的Hub基因,其中FGG表达下调,其他基因表达上调。 展开更多
关键词 A549细胞 上皮-间质转分化 差异表达基因 生物信息学 肺纤维化
ECT2通过调控EGFR介导的上皮间质转化促进胰腺癌转移 认领
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作者 王俊雄 朱圣韬 张澍田 《临床和实验医学杂志》 2020年第14期1460-1464,共5页
目的研究上皮细胞转化因子2(ECT2)在胰腺癌转移的作用及其可能的诱导表皮生长因子受体(EGFR)相关的上皮-间充质转化(EMT)机制。方法使用免疫组织化学和Western blotting方法检测ECT2在胰腺癌组织及细胞系中的表达情况。在胰腺癌细胞中降... 目的研究上皮细胞转化因子2(ECT2)在胰腺癌转移的作用及其可能的诱导表皮生长因子受体(EGFR)相关的上皮-间充质转化(EMT)机制。方法使用免疫组织化学和Western blotting方法检测ECT2在胰腺癌组织及细胞系中的表达情况。在胰腺癌细胞中降低ECT2的表达,通过细胞划痕实验测定胰腺癌的细胞迁移变化,使用Transwell实验检测胰腺癌细胞的侵袭力。通过Western blotting方法测定EMT标志物和EGFR的表达变化。结果ECT2在胰腺癌组织和细胞中显著上调,并提示不良预后。ECT2调控胰腺癌细胞的侵袭和迁移。ECT2沉默下调EGFR表达同时抑制EMT。结论ECT2可能通过EGFR信号通路相关的EMT促进胰腺癌细胞的侵袭性。 展开更多
关键词 胰腺癌 上皮细胞转化因子2 上皮间质转化 表皮生长因 子受体
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LHPP对上皮性卵巢癌恶性行为的影响及其机制研究 认领
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作者 郭丽 刘红 +1 位作者 楚蔚昕 张萍 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期515-519,共5页
目的:探讨磷酸化磷酸组氨酸无机焦磷酸酶(LHPP)对上皮性卵巢癌恶性行为的影响及其机制。方法:选择2016年9月至2019年9月在青岛市市立医院留存的上皮性卵巢癌及正常卵巢的新鲜组织和石蜡切片,采用免疫组化法检测LHPP在上皮性卵巢癌和正... 目的:探讨磷酸化磷酸组氨酸无机焦磷酸酶(LHPP)对上皮性卵巢癌恶性行为的影响及其机制。方法:选择2016年9月至2019年9月在青岛市市立医院留存的上皮性卵巢癌及正常卵巢的新鲜组织和石蜡切片,采用免疫组化法检测LHPP在上皮性卵巢癌和正常卵巢组织中的表达;应用CCK-8增殖实验和平板克隆实验检测LHPP对卵巢癌细胞增殖能力的影响;Transwell小室实验检测对细胞侵袭、迁移能力的影响;蛋白印迹法检测上皮间质转化(EMT)相关生物标志物的表达。结果:LHPP在卵巢癌组织中的表达水平显著高于正常卵巢组织(P<0.01),上皮性卵巢癌中LHPP蛋白的表达水平与手术病理分期、组织学分级、肿瘤糖类抗原125(CA125)水平明显相关(P<0.05),而与患者年龄是否>50岁、病理类型和肿瘤直径均无关(P>0.05)。高表达LHPP组的卵巢癌细胞生长速度、克隆形成数、穿膜细胞数明显高于对照组。高表达LHPP后,上皮表型标志物表达下调,而间质表型标志物表达上调。结论:LHPP在上皮性卵巢癌中高表达,可能通过调控EMT过程,促进卵巢癌细胞的增殖、侵袭及迁移,有望成为上皮性卵巢癌的预后标志物及临床治疗靶点。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 磷酸化磷酸组氨酸无机焦磷酸酶 上皮间质转化 增殖 侵袭
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长基因间非编码RNA 472靶向微小RNA-942-5p对非小细胞肺癌细胞上皮间质转化的影响 认领
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作者 刘杨 谢辉 +3 位作者 谢明水 张秋莹 陈丹丹 王原媛 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2020年第9期796-802,共7页
目的探讨长基因间非编码RNA 472(LINC00472)靶向调控微小RNA-942-5p(miR-942-5p)表达及对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法采用GEPIA分析来自TCGA数据库的969例NSCLC组织(483例腺癌+486例鳞癌)的LINC00472水平,实... 目的探讨长基因间非编码RNA 472(LINC00472)靶向调控微小RNA-942-5p(miR-942-5p)表达及对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法采用GEPIA分析来自TCGA数据库的969例NSCLC组织(483例腺癌+486例鳞癌)的LINC00472水平,实时荧光定量PCR(qPCR)检测正常肺上皮细胞BEAS-2B及NSCLC细胞系(NCI-H157、NCI-H1975和A549)的LINC00472水平。构建LINC00472过表达质粒pcDNA3.1-LINC00472并采用脂质体法转染A549细胞,根据转染质粒分为3组:未转染任何质粒的空白对照组、转染pcDNA3.1质粒的阴性对照组和转染pcDNA3.1-LINC00472质粒的过表达组。MTT比色法、划痕实验和Transwell小室实验检测A549细胞的增殖活力、划痕愈合率和穿膜细胞数,qPCR和Western blotting检测EMT相关因子E-钙黏蛋白(E-cad)、N-钙黏蛋白(N-cad)和波形蛋白(Vim)的水平,LncBase预测LINC00472与miR-942-5p的结合序列并经荧光素酶报告基因实验验证两者的靶向关系。结果GEPIA在线分析显示,NSCLC组织的LINC00472水平低于正常组织(P<0.05);NSCLC细胞的LINC00472水平均低于BEAS-2B细胞(P<0.05),选取水平最低的A549细胞进行后续功能实验。过表达组的LINC00472和E-cad水平升高,而miR-942-5p、N-cad和Vim水平降低(P<0.05)。过表达组转染48、72 h后的增殖活力低于其余两组(P<0.05)。过表达组的划痕愈合率为(29.148±3.034)%,低于空白对照组的(84.517±8.722)%和阴性对照组的(87.479±5.672)%,穿膜细胞数为(144.437±12.178)个,亦低于空白对照组的(240.365±14.156)个和阴性对照组的(224.713±17.805)个,差异有统计学意义(P<0.05)。荧光素酶活性检测结果显示,miR-942-5p模拟物能抑制LINC00472野生型质粒的荧光素酶活性(P<0.05),但对突变型无影响(P>0.05)。空白对照组和阴性对照组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。结论LINC00472在NSCLC组织和细胞中表达均下调,增强LINC00472表达可抑制NSCLC细胞的EMT和侵袭迁移能力,可能通过靶� 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 长基因间非编码472 微小RNA-942-5p 上皮间质转化
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扩散加权成像和循环肿瘤细胞对食管鳞癌患者放化疗短期疗效的预测价值 认领
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作者 贾争艳 吴小源 +3 位作者 刘杨 路双 秦建军 曲金荣 《放射学实践》 北大核心 2020年第3期372-379,共8页
目的:探讨磁共振扩散加权成像(DWI)和循环肿瘤细胞(CTCs)预测食管鳞癌(ESCC)患者放化疗短期疗效的价值。方法:回顾性搜集2016年11月-2018年4月经病理证实的ESCC并接受放化疗治疗的51例患者,所有患者治疗前行DWI检查和检测外周血CTCs;在... 目的:探讨磁共振扩散加权成像(DWI)和循环肿瘤细胞(CTCs)预测食管鳞癌(ESCC)患者放化疗短期疗效的价值。方法:回顾性搜集2016年11月-2018年4月经病理证实的ESCC并接受放化疗治疗的51例患者,所有患者治疗前行DWI检查和检测外周血CTCs;在DWI上测量病灶的表观扩散系数(ADC),CTCs分离采用CanPatrolTM CTC-二代富集技术,并根据上皮-间质转化(EMT)的标志物表达情况,分为上皮型、间质型、混合型3种类型;根据实体瘤的疗效评价(RECIST 1.1)标准进行短期疗效评价,完全缓解(CR)和部分缓解(PR)分为缓解组,病变进展(SD)和病变稳定(PD)分为未缓解组。比较两组各参数间的差异,采用受试者操作特征曲线(ROC)分析治疗前ESCC的ADC值及CTCs分别及联合预测疗效的诊断效能。结果:51例患者中,缓解组34例,未缓解组17例。治疗前疗缓解组ADC值[0.72(0.51~0.97)×10-3mm2/s]低于未缓解组[1.20(0.86~1.42)×10-3mm2/s],差异有统计学意义(Z=-2.857,P=0.004)。治疗前缓解组、未缓解组的间质型CTCs分别为1(0~2.25)、0(0~1),差异有统计学意义(Z=-2.333,P=0.020),而上皮型CTCs、混合型CTCs、CTCs总数在缓解组和未缓解组之间,差异无统计学意义(P=0.377、0.771、0.734)。ADC值、间质型CTCs和两者联合预测ESCC放化疗的ROC曲线下面积分别为0.747、0.689和0.825,预测放化疗疗效的敏感度分别为76.5%、70.6%和70.6%,特异度分别为79.4%、61.8%和85.3%。结论:ADC值和间质型CTCs可以作为预测ESCC放化疗短期疗效的方法,两者联合预测放化疗短期疗效诊断价值较高。 展开更多
关键词 扩散加权成像 食管肿瘤 放射治疗 上皮间质转化 循环肿瘤细胞
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微小RNA-4295靶向调控多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1对脑胶质瘤细胞增殖、侵袭和上皮-间充质转化的影响 认领
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作者 王剑新 王紫括 王斌 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1603-1606,共4页
目的观察微小RNA(miRNA,miR)-4295靶向调控多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)对脑胶质瘤细胞增殖、侵袭和上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法选取2018年6月到2020年4月经手术切除的120例脑胶质瘤及癌旁组织作为研究对象,采用荧光... 目的观察微小RNA(miRNA,miR)-4295靶向调控多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)对脑胶质瘤细胞增殖、侵袭和上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法选取2018年6月到2020年4月经手术切除的120例脑胶质瘤及癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析胶质瘤组织和癌旁组织中miR-4295表达水平。采用慢病毒在脑胶质瘤细胞系U251建立miR-4295沉默细胞系(实验组)和对照细胞系(对照组)。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析两组细胞增殖能力;采用Transwell分析细胞侵袭能力;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析对照组和实验组EMT标志物表达变化。生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-4295基因,并分析对照组和实验组细胞靶蛋白表达水平。组间数据比较采用t检验。结果与癌旁组织(1.29±0.20)比较,脑胶质瘤组织中miR-4295表达水平(2.81±0.19)显著增加,差异有统计学意义(t=2.809,P<0.05)。与对照组(1.07±0.15)比较,实验组细胞miR-4295表达水平(0.38±0.11)显著下调,差异有统计学意义(t=2.441,P<0.05)。与对照组细胞48 h吸光度(A)值(1.61±0.25)比较,实验组细胞48 h A值(1.22±0.18)显著下降,差异有统计学意义(t=2.091,P<0.05)。与对照组细胞[(89.27±9.10)个]比较,实验组侵袭细胞数量[(32.49±5.94)个]显著下降,差异有统计学意义(t=4.109,P<0.05)。与对照组细胞N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)蛋白表达水平(1.13±0.13、1.20±0.19)比较,实验组细胞N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平(0.30±0.11、0.37±0.12)显著下调,差异有统计学意义(t=3.091、2.861,P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶报告基因显示LRIG1是miR-4295靶基因。癌旁组织中LRIG1相对表达水平(1.05±0.22)比较,肿瘤组织LRIG1相对表达水平(0.23±0.11)显著下调,差异有统计学意义(t=3.021,P<0.05)。与对照组细胞LRIG1相对表达水平(0.35±0.13)比较,实验组细胞LRIG1相对表达水平(0.89±0.17) 展开更多
关键词 微小RNA-4295 多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1 脑胶质瘤 增殖 侵袭 上皮-间充质转化
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